第四章 反复胰蛋白酶消化法培养SD大鼠视网膜Muller细胞.pdfVIP

of Medical 沈阳医学院学报Journal 1卷第3期2009年9月 ShenyangCollege第1 反复胰蛋白酶消化法培养SD大鼠视网膜Muller细胞 王若冰 (上海第二军医大学附属一院眼科，上海200433) [摘要]目的：通过反复胰蛋白酶消化法，建立Muller细胞的培养和纯化方法。方法：采用新生7天的SD大鼠，解剖镜 下取视网膜，反复胰蛋白酶消化法消化贴壁后的细胞，细胞形态一致后行免疫组织化学和形态学检查。结果：所得细胞的 90％左右谷氨酰胺合成酶(GS)免疫组化染色阳性；荧光显微镜下可见细胞胞体巨大，足突明显，证明是Muller细胞。 结论：反复胰蛋白酶消化法是一种简单、可靠的Muller细胞培养方法。 [关键词]Muller细胞；细胞培养；胰蛋白酶消化法 [中图分类号]R774 [文献标识码]A [文章编号]1008—2344(2009)03—0171—03 Pancreatic Methodfor MullerCellsofSDRats Repeated Enzyme-degistingCulturing WANG Ruo-bing of FirstAtfiliated ofTheSecond Medical (DepartmentOphthalmology，TheHospital Military School，Shanghai200433，China) finda tocultureand cells of of series [Abstract】Objective：Toway pu曲Mullerby steps．Method：Retinas7-day—newbornrats， were underanatomical aftercellswereattachedtonutritivefflediUl／1． eyeballsrequired microscope，repeatedpancreaticenzyme digesting Mullercellswereidentified the observedfluorescence cultured byi删bemitry．andmorphologybya microscope．Results：CeⅡs have cellbodiesandinorethanorefoot 90％ceilsare for tobeMuller large processes．About positivestainingglutaIllinesynthetase．proved methodisa andreliablefor Mullercells． cell．Conclusion：RepeatedpancreaticenzylYle—digestingsidle way culturing method [Keywords]Mullercell；cellculture；enzyme-degisting 人们对Muller细胞的关注始于神经生物学家 发现视网膜电图的b波源于Muller细胞的去极化。 再置于解剖显微镜下去除眼前节组织，虹膜恢复 实际上，Muller细胞作为视网膜最主要的神经胶质 D． 器小心剥离视网膜神经上皮，再置于含5ml 细胞贯穿整个视网膜，包绕视网膜上各级神经元 Hanks液的培养皿中。显微眼科剪将其尽可能剪成 的胞体、突起及视网膜血管，毗邻视网膜周围结