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6-2 基因工程及其应用00
基因工程及其应用 基因工程:又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。 常用的运载体: 质粒、噬菌体和动植物病毒等 1、什么是基因工程? 2、基因工程的原理是什么? 第一步:获取目的基因 * 第2节 江苏省滨海中学 水母 转鱼抗寒基因的番茄 转基因鲑鱼 高产、稳产和具有优良品质的农作物和具有抗逆性的作物新品种. 抗虫害的玉米 什么是基因工程? 基因工程的原理是什么? 原 理: 操作水平: 结 果: 目的基因 供体细胞 受体细胞 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 二、基因操作的工具 1.基因的“剪刀”──限制性内切酶(限制酶) 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切割点上切割DNA分子。 专一性 如:EcoliI限制酶 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 思考: GAATTCCGTAGAATTCGGATT 尝试写出下列序列受EcoliI内切酶作用后的黏性末端 CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 2、基因的针线──DNA连接酶 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 基因的针线:DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 目的要求:模拟重组DNA分子的操作过程,说出其基本原理 材料用具:两种有不同碱基序列颜色的硬纸板, 剪刀(代表EcoliI), 透明胶带 方法步骤: 重组DNA分子的模拟操作 思考与讨论: 该过程中,如果碱基不能配对,你认为是什么原因造成的? 1、分别从两纸板上找出EcoliI的切割位点进行切割. 2 、将白色纸板的DNA片段重组到彩色纸板切口处. 3 、用透明胶带将切口黏结起来. 3、基因的运输工具——运载体 标记基因,便于进行检测。 质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子. 用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 目的基因与运载体结合 三、基因工程基本步骤 获取目的基因 将目的基因导入受体细胞 导入 扩增 常用的受体细胞:菌类和动植物细胞 目的基因的表达和检测 大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 一、基因工程与作物育种 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 获得高产、稳产和具有优良品质的农作物和具有抗逆性的作物新品种。 2、基因工程与药物研制 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。 微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。 胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。 将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%! 3、 环境保护 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种
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