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丙酮酸(钠)对细胞生长的影响 丙酮酸分批发酵动力学模型 第四章 丙酮酸发酵动力学模型的构建 随着丙酮酸浓度的增加,最终细胞浓度逐渐降低, 当丙酮酸达到100 g/L时,菌体生长完全受到抑制。 依赖于温度的丙酮酸发酵动力学模型方程 温度与动力学参数关系及模型表示 第四章 依赖于温度的丙酮酸发酵模型方程的验证 T. glabrata CCTCC M202019分批发酵生产丙酮酸动力学模型的验证: A (29℃); B (33℃) △ Glucose □ Pyruvate ○ DCW Model value 第四章 拟合的模型较好地描述了26-34 oC范围内丙酮酸分批发酵过程。 不同温度下动力学参数间关系 图 3 模型参数与温度之间的关系 第四章 30oC时的Xm较26oC和34oC时高36.9%和48.2% μm随温度升高而增大,延滞期缩短。 较高的温度下丙酮酸对菌体生长和产酸的抑制作用较强。 合适的温度有利于丙酮酸的合成。 较高的温度导致发酵后期单位细胞消耗葡萄糖和生产丙酮酸的能力逐渐下降。 温度对丙酮酸发酵过程影响解析 (1) 延滞期 (2) 后期 第四章 X相同, μm随温度升高而增大,细胞生长延滞期随温度的升高而不断缩短。 πm随温度升高而增大,即产酸延滞期随着温度的升高而不断缩短。 在模型中,令T=34 oC,积分至61 h,可计算的X = 8.33 g/L, P = 56.9g/L。 当丙酮酸积累至较 高浓度时,可以降 低温度,减轻丙酮 酸对的抑制作用。 丙酮酸分批发酵过程中温度控制轨迹 第四章 初始条件:度X0 = 1 g/L,初始丙酮酸浓 度P0 = 0,初始葡萄糖浓度S0 = 120 g/L 控制条件:发酵时间t ≤ 80 h, 积分时间步长为1 h。简化后取 26 oC ≤ T ≤ 34 oC,且为整数 取最优控制的目标函数为丙酮酸浓度最大,计算得到丙酮酸分批发酵温度控制轨迹 最优温度控制条件下丙酮酸发酵过程 最优温度控制条件下和恒定30 oC下的丙酮酸发酵过程比较 ▲The optimal temperature control strategy △30℃ 第四章 最优温度控制条件下丙酮酸发酵结果 第四章 最终发酵周期缩短12 h,丙酮酸产量(80.4 g/L)、对葡萄糖产率(0.70 g/g) 和生产强度(1.32 g/(L?h))则分别提高了12.9%、6.9%和32.8% 。 丙酮酸分批发酵过程中温度控制策略的生理解析 温度为34 oC时α-KG的积累量(5.41 g/L)为26 oC时(0.6 g/L)的9倍。不同温度下发酵结束时培养基中的甘油积累量相差达 6.53倍。发酵中后期,降低发酵温度可以有效的控制发酵副产物的生成。 第四章 本章结论 (1) 较高的发酵温度加速T. glabrata积累丙酮酸;而较低的温度则可减轻高浓度丙酮酸对细胞生长和产酸的抑制,提高细胞后续产酸能力; (2) 控温轨迹下:最终发酵周期缩短12 h,丙酮酸产量(80.4 g/L)、对葡萄糖产率(0.70 g/g)和生产强度(1.32 g/(L?h)) 则分别提高了12.9%、6.9%和32.8%; (3) 最优控温策略下,丙酮酸发酵的代谢流分布发生了改变,发酵副产物甘油和α-酮戊二酸的最终生成量仅2.10 g/L和1.57 g/L,分别为30 oC恒温发酵过程的59.2%和44.7%。 第四章 研究总结 本研究的目的是:以光滑球拟酵母发酵生产丙酮酸为模型,通过研究丙酮酸发酵过程中的强化策略,以获得高效率的丙酮酸发酵模式。基于此,以模型分析和过程调控为基本手段,获得如下研究结果: (1) 分级指数流加限制性缺陷因子以控制其在发酵体系中的“丰度”,可以解决目的产物得率和生产强度之间的矛盾。 (2) 发酵底物的供给具有奇异区间,通过模型解析,对发酵过程进行有针对性的阶段划分和准优化控制能够强化目的产物生产效率。 (3) 温度能够影响丙酮酸发酵的代谢流分布。模型计算结合模型参数分析后产生的控制轨迹可以削弱代谢副产物,强化丙酮酸发酵的主流代谢。 根据不同发酵阶段微生物细胞表观特性差异,调控适宜营养环境条件,强化微生物的过程功能,提高目标代谢产物生产效率的研究策略对其他的工业生物过程科学研究具有一定指导意义。 * * * * * * 江南大学生物系统与生物加工工程研究室 丙酮酸发酵过程中光滑球拟酵母过程功能的强化 第二章 第三章 绪论 第一章 第四章 调配维生素供给方式强化丙酮酸生产的过 程功能 奇异流加葡萄糖强化丙酮酸生产的过程功能 基于动力学模型调控温度强化丙酮酸发酵的过程功能 论文主要内容 立题背景和意义 第一章 基于微生物反应原理的过程功能强化技术 基于系统观点的生物
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