一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法.pdfVIP

泸州医学院学报 2010年 第 33卷 第 3期 JournalofLuzhouMedicalCollege Vo1．33 No．3 2010 225 i一 一 种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活 钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法 程 俊 ，曾晓荣 ，刘智飞，李鹏云 ，李妙龄 ，裴 杰 ，杨 艳 (泸州医学院心肌电生理学研究室 ，四川泸州 646000) 摘 要 目的：探讨一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法 ，使细胞内 环境保持稳定，改善常规全细胞膜片钳破膜所造成的封接不稳定。方法：以人肠系膜动脉平滑肌细胞为研究对象，采用穿孔全细 胞膜片钳技术，记录人肠系膜动脉平滑肌细胞上大电导钙激活钾通道 (big—conducatnceCa一activatedpotassiumchannels，BKo) 宏观电流 以及 自发性瞬时外向电流(spontaneoustransientoutwardcurrents，STOCs)。结果：采用这种穿孔全细胞膜片钳技术，能有 效记录到入肠系膜动脉平滑肌细胞上BK。和 STOCs。结论 ：穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞 电流的实验方法 ， 该方法 的建立为今后更深入的研究提供实验基础 。 关键词 平滑肌细胞；大电导钙激活钾通道 ；自发性瞬时外向电流 ；穿孔全细胞膜片钳 中图分类号 R331．38 文献标识码 A 文章编号 10o0—2669(2010)3-0225—04 AN EFFECTIVE METHOD oFRECORD G BIG—CONDUCTANCE CALCIUM —ACTIVATED PoTASSIUM CHANNEL CURRENTSBY PERFORATEDWHoLE—CELLPATCH CLAMPTECHNIQUEINHUMAN MESENTERIC ARTERY SM ooTH MUSCLE CELLS ChengJun，etal (InstituteofMyocardialElectrophysiology,LuzhouMedicalCollege) Abstract0bjective：Todiscussaneffectivemethodofrecordingbig——conductancecalcium—’activatedpotas。· slum channelcurrentsbyperforatedwhole-cellpatchclamptechniqueinhumanmesentericartery smoothmuscle cells．which makescellstomaintain astable internalenvironment，to improve conventionM whole—celIpatch— clampinstabilitycausedbytheruptureofmembrane．Methods：Inthisexperiment，big—conductancecalcium—ac— tivatedpotassium channelmacroscopiccurrentsandspontaneoustransientoutwardcurrentsinhumanmesenteric arterysmoothmusclecellsweremeasuredusingbyperforatedwhole-cellpatch-clampmethod．Results：Using ourmethod，BKcaandSTOCsinhumanmesentericarterysmoothmusclecellswereeffectivelymeasured．Conclu- sion：Perforatedwhole-cellpatch clamp technique isasimpleand effective experimentalmethod ofre