第十一章 核酸代谢-课件.pptVIP

作为核酸合成的原料 体内能量的利用形式 参与代谢和生理调节 组成辅酶 活化中间代谢物 体内核苷酸来源 自身合成（主要途径） 食物（次要） 不同种类的生物分解嘌呤碱的能力不同，因此，终产物也不同。 排尿酸动物：灵长类、鸟类、昆虫、排尿酸爬虫类 排尿囊素动物：哺乳动物（灵长类除外）、腹足类 排尿囊酸动物：硬骨鱼类 排尿素动物：大多数鱼类、两栖类 某些低等动物能将尿素进一步分解成NH3和CO2排出。 植物分解嘌呤的途径与动物相似，产生各种中间产物（尿囊素、尿囊酸、尿素、NH3）。 微生物分解嘌呤类物质，生成NH3、CO2及有机酸（甲酸、乙酸、乳酸、等）。 嘧啶碱的分解代谢 嘌呤核苷酸的合成代谢 AMP和GMP的生成 嘌呤核苷酸从头合成特点 ? 嘌呤核苷酸是在磷酸核糖分子上逐步合成的。 ? IMP的合成需5个ATP，6个高能磷酸键。 AMP或GMP的合成又需1个ATP。 嘌呤核苷酸的补救合成途径 补救合成的生理意义 1.补救合成节省从头合成时的能量和一些氨基酸的消耗。 2.体内某些组织器官，如脑、骨髓等只能进行补救合成。 嘧啶核苷酸的合成代谢 嘧啶核苷酸的从头合成 从头合成的调节 嘧啶核苷酸的补救合成 核苷酸的抗代谢物 嘌呤核苷酸的抗代谢物 嘧啶核苷酸的抗代谢物 嘧啶核苷酸的抗代谢物 脱氧核苷酸的生成 脱氧核苷酸的生成 dTMP的生成 遗传信息传递的 中心法则 半保留复制方式的重要性 确保遗传信息的稳定性，经过多少代复制后，核苷酸链仍保持完整。 半保留复制的特点 需要多种细胞组分的参与 受到细胞中多种条件的控制 复制要求具有高度的忠实性 DNA复制的一些基本概念 DNA复制 接受模板的指导 碱基互补 核苷酸依次加到加到DNA链的3’末端 链延伸方向：5’→3’ 能量：α与β磷酸基之间的高能键 DNA复制的体系 （一）底物：dNTP, N=A,T,C,G （二）模板：DNA单链 （三）引物： DNA聚合酶不能直接聚合游离的dNTP，必须由一段核酸片段提供3’OH末端使dNTP可以依次聚合。RNA或延长中的DNA子链 （四）酶和蛋白质因子 DNA聚合反应有关的酶类 DNA聚合酶 DNA聚合酶不能从头合成一条新链，只能催化NMP加到已有片段的3’OH末端 聚合酶I 聚合酶活性：通过核苷酸聚合反应，使DNA链延5’-3’方向延长 3’→5’外切酶活性：由3’末端水解DNA链 5’→3’外切酶活性：由5’末端水解DNA链 使3’末端DNA链发生焦磷酸解 无机焦磷酸和脱氧核糖核苷三磷酸之间的焦磷酸基交换 Klenow片段 DNA聚合酶的3′- 5′外切酶水解位点 DNA聚合酶5′- 3′外切酶活力 Klenow片段的结构 右手形状 两个裂隙 双链DNA的结合位点 聚合反应的催化位点、单链模板的结合位点 3’→5’外切酶活性靠近聚合酶位点 底物专一性：只有配对碱基才能进入凹槽 保真性：错配核苷酸落入3’→5’外切酶位点 聚合酶I的功能 5’→3’外切酶活性：作用与双链DNA 修复：切除嘧啶二聚体 切除冈崎片段的RNA引物 聚合酶II的功能 聚合作用:该酶催化DNA的聚合，但是对模板有特殊的要求。该酶的最适模板是双链DNA而中间有空隙(gap)的单链DNA部分，而且该单链空隙部分不长于100个核苷酸。对于较长的单链DNA模板区该酶的聚合活性很低。但是用单链结合蛋白(SSBP)可以提高其聚合速率，可达原来的50-100倍。 该酶也具有3‘→5’外切酶活性，但无5‘→3’外切酶活性 该酶对作用底物的选择性较强，一般只能将2-脱氧核苷酸掺入到DNA链中。 该酶不是复制的主要聚合酶，因为此酶缺陷的大肠杆菌突变株的DNA复制都正常。可能在DNA的损伤修复中该酶起到一定的作用。 聚合酶III的功能 DNA复制的主要聚合酶：具有5’-3’方向合成DNA的催化活性 由3’末端水解DNA链 由5’末端水解DNA链 大肠杆菌三种DNA聚合酶比较 DNA连接酶连接切口 引物合成酶 合成RNA引物 方向： 5’→3’ 拓扑异构酶（topoisomerase） 拓扑异构酶Ⅰ可使DNA双链中的一条链切断，松开双螺旋后再将DNA链连接起来，从而避免出现链的缠绕。 拓扑异构酶Ⅱ可切断DNA双链，使DNA的超螺旋松解后，再将其连接起来。 DNA解链酶 解链酶或rep蛋白，是用于解开DNA双链的酶蛋白，每解开一对碱基，需消耗两分子ATP。目前发现存在至少存在两种解链酶。 单链DNA结合蛋白 单链DNA结合蛋白（single strand binding protein, SSB）又称螺旋反稳蛋白（HDP）。这是一些能够与单链DNA结合的蛋白质因子。其作用为：① 使解开双螺旋后的DNA单链