第12章-1 细胞增殖及其调控-课件.pptVIP

第十二章细胞增殖与调控 细胞增殖的意义 ◆单细胞生物细胞增殖导致生物个体数量的增加。 ◆多细胞生物由一个单细胞即受精卵分裂发育而来， 细胞增殖是多细胞生物繁殖基础。 ◆成体生物仍然需要细胞增殖，主要取代衰老死亡的细胞， 维持个体细胞数量的相对平衡和机体的正常功能。 ◆机体创伤愈合、组织再生、病理组织修复等，都要依赖细胞增殖。 12.1 cell cycles 一、细胞周期 细胞周期:是指连续分裂的细胞从一次有丝分裂结束后开始生长到下次有丝分裂终止所经历的全过程。在这一过程中,细胞的遗传物质进行复制并均等地分配给两个子细胞。 图 ?可将高等动物的细胞分为三类： ①周期中细胞：连续分裂细胞，如表皮生发层、部分骨髓细胞。 ②静止期细胞（又称为休眠细胞）：暂不分裂，但适当刺激下可重新进入细胞周期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 ③终末分化细胞：不再分裂，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等。 二 细胞周期中各时 相及其主要事件 ◆G1期 (Gap1 phase) ◆S 期 (synthesis phase) ◆G2 期(Gap 2 phase) ◆ M期 G1期 S 期 G2期 M 期 细胞周期检验点（check point） 主要检验点： G1/S检验点：DNA是否损伤？细胞外环境是否适宜？细胞体积是否足够大？在芽殖酵母中称start点，在其它真核细胞中称限制点点(restriction point，R点)。 S/G2期检验点：DNA复制是否完成？ G2/M检验点：DNA是否损伤？细胞体积是否足够大？ 中-后期检验点（纺锤体组装检验点）：检验纺锤体组装是否完整 三 细胞周期时间的测定 细胞周期的时间长短与物种/细胞类型有关。G1期持续时间差异较大，M期最短,约0.5～4.5小时。 脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法（PLM）：用3HTDR对测定细胞脉冲标记、定时取材，通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法来测定细胞周期。 方法简述： 用3H—TdR标记细胞群体，洗脱3H—TdR后，不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的细胞，计算其中带标记的细胞占有丝分裂细胞的百分数。依标记分裂指数曲线升降过程，可推求出细胞周期各时相的时长。 变化规律： 最开始的有丝分裂指数为零，持续一段时间后开始出现标记有丝分裂的细胞，然后有丝分裂指数不断增加，经过一段时间达到峰值。峰值持续一段时间，然后逐步下降到零，有丝分裂指数为零持续一段时间，再次出现标记有丝分裂的细胞，进入下一个细胞周期循环。 ① 待测细胞经3H-TDR标记后，所有S期细胞均被标记。 ② S期细胞经G2期才进入M期，所以一段时间内PLM=0。 ③开始出现标记M期细胞时，表示处于S期最后阶段的细胞，已渡过G2期，所以从PLM=0到出现PLM的时间间隔为TG2。 ④ S期细胞逐渐进入M期，PLM上升，到达到最高点的时候说明来自处于S最后阶段的细胞，已完成M，进入G1期。所以从开始出现PLM到PLM达到最高点（≈100%）的时间间隔就是TM。 ⑤ 当PLM开始下降时，表明处于S期最初阶段的细胞也已进入M期，所以从出现PLM到PLM又开始下降的一段时间等于TS。 ⑥ 从PLM出现到下一次PLM出现的时间间隔就等于TC，根据TC=TG1+TS+TG2+TM即可求出的TG1长度。 事实上由于一个细胞群体中TC和各时相不尽相同，第一个峰常达不到100%，以后的峰会发生衰减，PLM不一定会下降到零，所以实际测量时，常以（TS+1/2TM）-1/2TM的方式求出TS。 三、细胞同步化 四、 细胞（周期）同步化 （一）自然同步化 1、多核体：如：粘菌、疟原虫。 2、水生动物的受精卵：如海胆、两栖类。 3、增殖抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠孢子移入适宜环境后，同步分裂。 （二）人工同步化 1、选择同步化 1）有丝分裂选择法 优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。 缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%～2%） 。 2）细胞沉降分离法(密度梯度离心法) 优点：省时，效率高，成本低。 缺点：同步化程度较低，且对大多数种类细胞不适用。 五 特异的细胞周期--Embryonic cell cycles 爪蟾早期胚胎细胞的细胞周期 ·细胞分裂快,无G1期, G2期非常短,S期也短(所有复制子都激活), 以至认为仅含有S期和M期 ·无需临时合成其它物质 ·子细胞在G1、G2期并不生长，越分裂体积越小 ·细胞周期调控因子和调节机制与一般体细胞标准的 细胞周期基本是一致的 酵母细胞的细胞周期 图 ·酵母细胞的细胞周期与标准的细胞周期在时相和调控方面相似