腺病毒介导VEGF165基因预防移植静脉再狭窄的研究.pdfVIP

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腺病毒介导VEGF165基因预防移植静脉再狭窄的研究毕业论文

目 录 腺病毒介导 VEGF165 基因预防移植静脉再狭窄的研究…………………… 1 中文摘要… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1 ABSTRACT………………………………………………… …………3 英汉缩略词对照表……………………………………………………………5 前言 …………………………………………………………………… 6 1 Ad5-VEGF165-CMV-EGFP 扩增、纯化及鉴定………………………………8 1.1 主要实验试剂、仪器………………………………………………………8 1.2 方法……………………………………………………………………9 1.2.1 AD5-VEGF165-CMV-EGFP 扩增………………………………………9 1.2.2 CSCL 密度梯度离心法纯化病毒………………………………………9 1.2.3 AD5 -VEGF165 -CMV-EGFP 鉴定………………………………10 1.2.4 50%组织培养感染剂量法 (TCID50)测定病毒滴度…………………11 2 腺病毒介导的VEGF165 转染兔自体移植静脉的研究……………………13 2.1 材料………………………………………………………………………13 2.2 方法 ……………………………………………………………………14 2.2.1 动物实验………………………………………………………………14 2.2.2 组织学检查及统计学分析……………………………………………16 2.2.3 检测移植静脉 VEGF165mRNA 表达……………………………………17 3 结果 …………………………………………………………………19 3.1 Ad5-VEGF165-CMV-EGFP 的扩增及纯化 ………………………………19 3.2 毒种目的基因 PCR 鉴定…………………………………………………19 3.3 滴度和纯度………………………………………………………………19 3.4 兔股动脉搭桥情况………………………………………………………19 3.5 移植静脉的 VEGF165mRNA 的表达………………………………………19 3.6 组织形态学观察…………………………………………………………20 4 讨论 ………………………………………………………………………22 4.1 移植静脉术后再狭窄的发生机制………………………………………22 4.2 VEGF 基因………………………… ……………………………………22 4.3 内皮细胞的修复在预防血管狭窄的作用………………………………23 4.4 腺病毒载体作为预防移植静脉再狭窄载体中最佳载体之一…………24 4.5 自制的动静脉血管支撑器………………………… …………………25 4 .6 不足之处和展望……………………… …………………………… 26 5 结论 ………………………………………………………………………27 6 附图………………………………………………………………………28 参考文献………………………………………………………………………3 1 综述…………………………………………………………………………… 36 攻读学位期间发表的学术论文目录………………………………………… 51 致谢…………………………………………………………………………… 52 腺病毒介导VEGF165 基因预防 移植静脉再狭窄的研究 中 文 摘 要 目的:携带免疫荧光的血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor 165 ,VEGF165)基因的复制缺陷性腺病毒(Adenovirus serotype 5,Ad5)即 Ad5-VEGF165-CMV-EGFP 在体外通过孵育的方法转染 静脉桥然后再行血管旁路移植术,研究 VEGF165 基因所表达的蛋白对自体 移植静脉内膜的影响。 方法:购买来的 Ad5-VEGF165-CMV-EGFP 在

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