5 2色谱理论基础.ppt

第五章色谱分析法 第二节 色谱基础理论 5.2.1 色谱基本关系式 2. 容量因子k与分配系数K的关系 5.分配系数与分离温度的关系 5.2.2 塔板理论—柱分离效能指标 有效塔板数和有效塔板高度 塔板理论的特点和不足： 5.2.3 速率理论—影响柱效的因素 1. 涡流扩散项——A 2. 分子扩散项——B/u 3.传质阻力项——C?u 4. 载气流速与柱效——最佳流速 5. 速率理论的要点 5.2.4 分离度 色谱分离中的四种情况如图所示： 分离度的表达式： 例题1： 例题2： 5.2.1 色谱基本关系式 5.2.2 塔板理论 5.2.3 速率理论 5.2.4 分离度 1.分配比 分配系数K：组分在两相间的浓度比； 分配比 （partition ratio，也称容量因子） k：分配达到平衡时，组分在各相中的质量比； k =ms / mm ms、 mm分别为组分在固定相和流动相中的质量。 式中β为相比。 填充柱相比：6～35； 毛细管柱的相比：50～1500 3. 分配比与保留时间的关系 容量因子越大，保留时间越长。可由保留时间计算出容量因子： 分离过程中的温度变化必然要影响到溶质在两相中的分配，即分配系数是物质的一种热力学参数。 对于一定的溶质和固定相，溶质的分配系数与分离温度间存在以下关系： 式中：a，b为常数；Tc为分离时的绝对温度。 由上式可见，分离温度越高，分配系数越小，即溶质在流动相中的浓度越大，保留时间越短，组分色谱峰流出分离柱也越快。 色谱柱长：L； 虚拟的塔板间距离：H； 色谱柱的理论塔板数：n； 则三者的关系为 n = L / H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为 单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。 用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。 组分在tm时间内不参与柱内分配。需引入有效塔板数和有效塔板高度： (1)当色谱柱长度一定时，塔板数 n 越大(塔板高度 H 越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多,柱效能越高，所得色谱峰越窄。 (2)不同物质在同一色谱柱上的分配系数及理论塔板数不同，用塔板数和塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。 (3)柱效并不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的分配系数 K 相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。 (4)塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。 速率方程（也称范.第姆特方程式） H = A + B/u + C·u 式中： H为理论塔板高度，u为载气的线速度(cm/s)。 减小A、B、C三项可提高柱效； 存在着最佳流速； A、B、C三项各与哪些因素有关？ A = 2λdp 式中：dp为固定相的平均颗粒直径； λ为固定相的填充不均匀因子。 固定相颗粒越小dp↓，填充的越均匀，A↓，H↓，柱效n↑。表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。 （动画） B = 2 νDg 式中：ν 为弯曲因子，填充柱色谱，ν1； Dg为试样组分分子在气相中的扩散系数（cm2·s-1）。 由于柱中存在着浓度差，产生纵向扩散： （动画） a. 扩散导致色谱峰变宽，H↑(n↓)，分离变差。 b. 分子扩散项与流速有关，流速↓，滞留时间↑，扩散↑ c. 扩散系数：Dg ∝（M载气）-1/2 ； M载气↑，B值↓ 组分在气相和液相两相间进行反复分配时，遇到阻力。 传质阻力包括气相传质阻力Cg和液相传质阻力CL ，液相传质阻力大于气相传质阻力。 即 C =（Cg + CL） （动画） 载气流速高时： 传质阻力项是影响柱效的主要因素，流速↑，柱效↓ ，右图曲线的右边。 载气流速低时： H - u曲线与最佳流速： 由于流速对这两项完全相反的作用，流速对柱效的总影响使得存在着一个最佳流速值，即速率方程式中塔板高度对流速的一阶导数有一极小值。 以塔板高度H对应载气流速u作图，曲线最低点的流速即为最佳流速。 分子扩散项成为影响柱效的主要因素，流速↑ ，柱效↑ ，右图曲线的左边。 (1)组分分子在柱内运行的多路径与涡流扩散、浓度梯度造成的分子扩散及传质阻力使气液两相间的分配平衡不能瞬间达到等因素是造成色谱峰扩展