胶体金试纸条的制备技术总结.ppt

SPA/G蛋白模式 判定 检测线 质控线 阳性 显色 显色 阴性 不显色 显色 胶体金免疫层析试纸质量检测 胶体金免疫层析试纸的应用 在兽药残留检测中的应用 Zhang等用克伦特罗制备的单克隆抗体标记胶体金作为检测探针，然后将偶联 BSA的克伦特罗作为 T 线，以竞争模式组装成试纸，用于样品的克伦特罗残留检测，为我国食品安全检测提供了有效的工具。之后 Zhang 的团队采用同样的模式制备并组装成功两类兽药残留检测试纸，分别为磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星残留检测胶体金免疫层析试纸，为我国兽药残留快速检测技术的发展奠定了基础。 在兽医疫病检测中的应用 Bhakar等应用相应的单抗标金，建立了阿米巴虫抗原检测方法。Kameyama等以牛病腹泻病毒的 NS3 蛋白制备单克隆抗体，并用胶体金标记单抗制备胶体金试纸，用于牛病毒性腹泻抗原的检测。Kang等以同样方式建立了猪轮状病毒胶体金抗原检测方法，并用于腹泻仔猪轮状病毒的鉴别诊断。Li等应用实验室制备的两种 PRRSV 单抗，以双单抗夹心的模式，组装成 PRRSV 抗原检测试纸，作为 PRRSV 感染的诊断工具。 上海金标生物生物科技有限公司 玻璃纤维膜/聚酯纤维膜 PVC塑料胶板 吸水纸 硝酸纤维素膜 PE标签保护膜 XYZ三维划膜喷金仪 数控高速斩切机 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * * * * * * 免疫胶体金技术简介 Immune colloidal gold technique 2015-1-27 目录 1 胶体金技术的种类 2 胶体金的合成 3 胶体金的标记与纯化 4 胶体金免疫层析法试剂的组成 5 胶体金免疫层析试纸的应用 7 胶体金技术的发展 胶体金免疫层析试纸的检测模式 6 胶体金免疫层析（Gold Immune – Chromatographic Assay, GICA）技术是结合了胶体金技术和免疫层析技术发展而来的，其本质为一种固相反应的 ELISA,并用胶体金来代替底物显色。 免疫胶体金技术 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。 胶体金标记 实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。 胶体金技术的发展 1939-----雏形 Kausche等把烟草花叶病毒吸附到金颗粒上在电子显微镜下观察金离子呈高电子密度。 1971------作为标记物应用于免疫组织化学研究 Faulk等首先将兔抗沙门菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直接免疫细胞化学技术检测沙门菌的表面抗原。 1974------实现间接免疫金染色法 Romano将胶体金标记到马抗人的IgG上，实现了间接免疫金染色法 胶体金技术的种类及优点 快速免疫金渗滤法(immuogold filtration assay ,IGFA) 即穿流式(flow through)的固相膜免疫测定。 主要由两部分组成：膜渗滤装置和标记结合物。前者为一塑料小盒，其中填满吸水性物质，面上紧贴放置一片吸附有抗体(以双抗体夹心法测抗原为例)的硝酸纤维膜，标记结合物为免疫金。 A：金标记抗体 B：标本中的抗原 C：包被抗体 D：NC膜 E：吸水材料 F：塑料盒 免疫层析法( immunochromatogra-phy，ICA) 是继IGFA之后发展起来的另一种固相膜免疫测定，与IGFA利用微局限性膜的过滤性能不同，免疫层析法中滴加在膜一端的样品溶液受膜的毛细管作用(基于层析作用的横流 （lateral flow） )向另一端移动。移动过程中被分析物与固定在膜上某一区域的受体(抗原或者抗体)结合而被固相化，无关物质则越过该区域而被分离，然后通过标记物显色来判定试验结果，以胶体金为标记物的实验称为胶体金免疫层析试验。 免疫胶体金技术的特点 优点： 检测方法简单而快速，数分钟即可得出结果； 不需仪器设备，操作人员不需特殊训练； 试剂稳定，适用于单份测定； 无污染； GICA的特点是单一试剂，一步操作。小型实验室即有条件开发生产。 干燥包装的试剂可在室温保存一年以上。?? 成为目前“病