共振光散射及荧光光谱法研究冰片对DNA的抑病机制.pdfVIP

第 24卷，第6期 光 谱 实 验 室 Vo1．2 4。No．6 2 0 0 7年 1 1月 Chbze．w Journal of Spectroscopy Laboratmy November，200 7 共振光散射及荧光光谱法 研究冰片对DNA的抑病机制 苏布道① (兰州大学化学化工学院 兰州市 730000) (内江师范学院图书馆 四川省内江市东兴区东桐路705号 641112) 摘 要 首次在分子水平上研究了冰片与DNA的相互作用．以期发现冰片的抗病机理。通过共振光 散射技术、荧光光谱法以及粘度法，确定了冰片与DNA的作用方式为部分嵌入式。在pH7．40。温度37 C。 离子强度低于0．01mol／L条件下．冰片与DNA发生反应。导致410nm和470nm处的共振光散射增强，且 反应体系至少在12h内保持稳定。通过改变反应体系的离子强度和pH值，发现二者的反应对离子强度及 反应体系的pH值具有较强的敏感性。同时通过粘度实验和EB(溴化乙锭)荧光探针竞争实验发现：冰片的 加入使DNA双螺旋发生扭结。导致DNA的粘度减少；冰片使EB—DNA体系的荧光强度降低。 关键词 冰片。小牛胸腺．嵌入式。共振光散射。溴化乙锭。粘度。 中图分类号：0561．3；0657．32 文献标识码：A 文章编号：1004-8138(2007)06-0995-07 1 前言 冰片辛苦，微寒，性凉，归心、脾、肺经，有开窍醒神，清热止痛，生肌之功效。目前冰片在临床上 的应用极为广泛，仅2000版中国药典收录的含有冰片的中成药就有苏合香丸、复方丹参滴丸等20 余种。特别是冰片在心脑血管疾病中的应用尤其引人关注。 冰片分子量为154．24，是小分子脂溶性单萜类物质，具有抗菌[1]、抗炎[2 以及止痛作用[3]。冰片 对循环系统的作用一直倍受关注。单味冰片对急性心肌梗塞有使冠状窦血流量回升，减慢心率和降 低心肌耗氧量的作用。这与临床上冰片缓解心绞痛、扩冠等现象相一致[4 ；在药物动力学方面，冰片 经常被作为“药引”，在临床上常与当归、川芎等药联合作用，以增强药效。治疗心脑血管疾病的中成 药如苏冰滴丸、心血宁片、速效救心丸等都含有冰片，这对心脑血管疾病的治疗有一定的开发和利 用价值。目前心脑血管疾病患者的增多，研究相应的对策已成为当今药物研究开发的重要领域，深 入研究冰片的药理作用，特别是对心脑血管系统的作用机制，已成为心脑血管疾病治疗的新途 径 。 值得注意的是，尽管治疗心脑血管疾病的药物中，越来越多地使用冰片，且在进行处方精简时 曾把冰片作为主要有效成分保留，将冠心苏合丸改为苏冰滴丸，但对冰片本身对心脑血管有什么作 用，其作用原理如何，目前认识并不充分。自古以来医学家多以“佐使之药”用之，但冰片并非仅仅通 过提高其他药物的生物利用率而发挥药效。目前很多实验中并没有单味冰片的对照研究内容；有关 基础理论方面的研究也很少见。 ① 联系人。电话：(O832)2341239；(0832)5063990；E—mail：subudao2003@126．conl 作者简介：苏布道(198o一)，女‘蒙古族)。内蒙古乌兰浩特市人．硕士。主要从事中药药效成分的现代发光分析法研究。 收稿日期：2007—08—01；接受日期：2007—09—05 光谱实验室 第24卷 2 实验部分 2．1 仪器和试剂 RF一540荧光分光光度计(日本岛津公司)用于扫描共振光散射(Resonance Light Scattering，以 下简称RI S)光谱和测定RI S强度值；UV一240紫外可见分光光度计(日本岛津公司)用于扫描吸 收光谱；pHS一10C型酸度计(浙江萧山仪器厂)用于测量酸度值；SBQ8—1835乌贝路德粘度计(上海 恩尔达科学仪器有限公司)用来测定DNA溶液的粘度；MVS一1漩涡混合器(北京北德科学仪器公 司)用于将反应物均匀混合。 核酸溶液：小牛胸腺脱氧核糖核酸(calf thymus