羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton微板法).pdfVIP

北京雷根生物技术有限公司 羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton微板法) 简介 ： 在生命活动的代谢过程中不断产生各种自由基 ，其中羟自由基·OH是体内最活跃的活 性氧 ，可介导许多生理变化。羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子 ，造成 细胞结构和功能受损 ，进而导致体内代谢紊乱引起疾病 ，如引发不饱和脂肪酸发生脂质过 氧化反应 ，并损伤膜结构和功能。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一 ， 在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。 Leagene 羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton微板法)又称羟自由基清除能力检测试 2+ 剂盒或羟自由基检测试剂盒 ，其检测原理 H O /Fe 通过 Fenton反应产生羟自由基 ，将 2 2 2+ 3+ Fe 氧化为 Fe ，产生的亚磺酸与偶氮染料反应生成偶氮岚 ，以酶标仪测定吸光度 ，在一 定范围内颜色深浅与产生的羟自由基成正比 ，求得标准曲线 ，通过分析捕获产生的羟自由 基可计算出自由基清除率或清除能力。该试剂盒主要用于测定植物组织、血清、血浆等样 本中的羟自由基清除率或羟自由基清除能力。该试剂盒仅用于科研领域 ，不宜用于临床诊 断或其他用途。 组成 ： 编号 TO1131 Storage 名称 100T 试剂(A) OH Lysis buffer 500ml RT 试剂(B) OHAssay buffer 50ml RT 避光 试剂(C) H O 基液 1ml RT 2 2 试剂(D) OH显色液 100ml 4℃ 避光 使用说明书 1份 自备材料 ： 1、蒸馏水 2、实验材料 ：植物组织(芹菜、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等 3、研钵或匀浆器 4、离心管或试管 5、离心机 6、96孔板 7、酶标仪 北京雷根生物技术有限公司 操作步骤(仅供参考) ： 1、准备样品 ： ①植物样品 ：取正常或逆境下的新鲜植物组织 ，清洗干净 ，擦干 ，切碎 ，迅速称取 ，样品 ： OH Lysis buffer 的比例 ，加入 OH Lysis buffer后匀浆或研磨 ，室温静置 ，离心 ，上清液 即为羟自由基粗提液 ，4℃保存备用。 ②血浆、血清和尿液样品 ：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定 ， 4℃保存 ，用于羟自由基(·OH)的检测。 ③高活性样品 ：如果样品中含有较高浓度的羟自由基(·OH) ，可以使用 OH Lysis buffer进 行恰当的稀释。 2、配制 OHAssay buffer工作液 ：取适量的OHAssay buffer和 H O 基液 ，按 OHAssay 2 2 buffer ：H O 基液的比例混合 ，即为 OHAssay buffer工作液 ，避光保存 1周有效。 2 2 3、配制 OH萃取洗涤液 ：取适量的蒸馏水和 OH萃取液 ，按蒸馏水 ：OH萃取液的比例混 合 ，即为 OH萃取洗涤液。 4、OH加样 ：按照下表设置对照管、测定管 ，溶液应按照顺序依次加入 ，并注意避免产生 气