灭菌工艺验证解决方案.ppt

* F0的定义及其意义 F0是指在某特定温度下所产生的灭菌效果与在121.1oC下相等效时所需要的灭菌时间（分钟）. 121.1 oC 或250 oF表示~100 KPa 饱和蒸汽的温度, 为标准灭菌温度； F 0值用于评价热（湿/干热）灭菌工艺的对微生物的杀灭效果. F0值可用来比较不同温度下的灭菌效果 F0值既可用生物学方法测定，也可用数学方法积分测得（积分时务必采用121.1 oC, 因为每相差0.1 oC, F0 将会产生2.4% 的偏差） * 药典对F0 的要求 BP – 蒸汽灭菌程序赋予产品的F0值不得低于8分钟 – 制定依据: 多数嗜温性细菌芽孢在121.1 oC下的D值在30秒至1分钟之间. USP 1211 – 蒸汽灭菌过度杀灭程序赋予产品的F0值不得低于12 分钟. – 目标: 使在121.1 oC下D值为1分钟的细菌芽孢下降12个对数单位(双倍于无菌保证值). – 可采用其它灭菌程序，但要保证符合无菌标准 EP 、CP – 蒸汽灭菌程序通常应为在121 oC下灭菌15分钟 – 可采用其它灭菌程序，但要保证符合无菌标准 * F0与FT的相互关系 F0 = D121.1 ×( logN0 -logNt ) FT = DT ×( logN0 -logNt ) F0 / FT = D121.1 / DT = 10(T －121.1)/Z = L (灭菌率) 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * *  湿热灭菌工艺的微生物学验证知识 * 概念与方式 基础概念 灭菌工艺 无菌 药品达到无菌要求的两种方式 无菌生产工艺 最终灭菌 * 两种生产方式的比较 无菌生产工艺的局限 通常的无菌保证水平（10-3至10-6） 影响因素较多 最终灭菌工艺的优点 赋予产品更高的无菌保证水平 生产中可变因素少，出现偏差的概率低 几乎能杀灭产品中的所有微生物 * 制药工艺中常用的灭/除菌方式 热力灭菌 湿热灭菌 （118--134℃）--蒸汽、过热水 干热灭菌（160--320 ℃）--热空气 气体灭--环氧乙烷 离子辐射灭菌--γ辐射和电子束辐射 过滤除菌法--过滤名义孔径小于等于0.2μm * 热力灭菌的基本原理 湿热灭菌—导致细胞内关键性蛋白质和酶发生热变性或凝固.湿度对该破坏性过程起促进作用. 干热灭菌---使微生物氧化而不是蛋白质变性. * 细菌细胞结构 细胞质膜 细胞壁 荚膜 异染颗粒 线毛 鞭毛 色素体 脂质颗粒 中体 核糖体 拟核 模隔壁 * 湿热灭菌的热力学基础 水-蒸汽系统处在饱和状态时的性质 温度℃ 压力Bar 焓（内部热量）J/g 水hL △h* 蒸汽hV 100 1.013 419 2256 2675 115 1.692 483 2216 2699 120 1.987 504 2202 2706 121 2.026 508 2199 2707 125 2.322 525 2188 2713 饱和蒸汽表 △h = hV-hL，凝结或汽化潜热，1 Atmosphere = 1.013 bar = 14.71 psia * 热力灭菌设备 过热水灭菌釜 干热灭菌釜 蒸汽灭菌釜 * 湿热灭菌工艺研发与确认 灭菌工艺的验证 工艺研发阶段 工艺确认阶段 方法设计 装载类型 工艺类型 工艺开发 性能确认 连续控制 非产品特异 性灭菌工艺 (过度杀灭法) 产品特异性 灭菌工艺 蒸汽不可透 过型物品 (液体型) 蒸汽可透过 型物品 饱和蒸汽型 · 预真空式 · 重力式 空气超压型 · 蒸汽/空气 混和方式 · 过热水方式 确定参数 · 升温阶段 · 保温阶段 · 降温阶段 物理学方法 · 温度分布 · 热穿透 生物学方法 日常放行 · 工艺评估 · 系统适用性 再确认 变更控制 * 最终灭菌产品无菌的标准 .无菌检查结果合格-存在局限性 批检不合格率、实际污染率和取样量之间的相互关系 取样量 实际污染率 0.1 1 5 10 15 10 0.01 0.09 0.40 0.66 0.80 20 0.02 0.18 0.65 0.89 0.96 50 0.05 0.34 0.92 0.99 100 0.09 0.63 0.99 300 0.26 0.95 3000 0.95 * 最终灭菌产品无菌的标准 通过物理/