去甲基化剂对胃癌rassf1a表达及生物学行为的影响.pdfVIP

i*$=t辩^拳博±*x 毒甲羞1弋荆对一癌RASSFiA裹gl自攀。为∞影响 Sensitive Chain Reaction，MSP)N讨 Polymerase 敏感性聚合酶链反应(Methylation 细胞在生长活性、细胞周期、凋亡以及对化疗药物敏感性等方面进行分析，初步 探讨去甲基化剂5-Aza．CdR对胃癌细胞生物学行为的影响，为胃癌的发生机制和 基因治疗提供有意义的数据和理论依据， 统计分析采用SPSS软件进行，P值小于O．05时认为有显著性差异。 结果显示： 1．在本研究中，18例正常对照胃组织标本中均可见RASSFIA阳性表达细 胞，着色集中于细胞胞浆。通过计算阳性细胞表达率，39例胃癌组织标 织RASSFlA表达明显不同，低分化癌较中分化和高分化癌表达显著减 fP=0，001)。 RASSFlA基因的表达。 均由甲基化引物出现相应的条带，而由菲甲基化引物未能扩增出相应的 产物；MKN45和作为阳性对照的HeLa细胞仅见由非甲基化引物的扩增 产物。 4．4株胃癌细胞经两种不同浓度5-Aza-CdR处理后，与对照组相比，生长 速度出现不同程度减慢，其中以MKN28和AGS两株改变为甚；经流式 细胞仪检测分析，4株细胞均无明显的Gl期、G2／M期阻滞作用，AGS 细胞凋亡率由O．6％增加为18．6％和20．2％，MKN28细胞亦出现凋亡率 i海第=E辩^尝博±*x 毒甲羞1弋荆对一癌RASSFiA裹gl自攀。为∞影响 处理AGS细胞组较对照组细胞克隆形成率显著降低(32．4％、28．5％vs 57．0％，PO．01)。 5．单独应用去甲基化剂5-Aza-CdR和化疗药物DDP均明显抑制胃癌细胞 见显著差异(尸=O．052)，其余3株胃癌细胞均可见明显疗效差别： 用完全培养液连续传代6代以上，RT-PCR仍可检测出基因的表达。 本研究结论： 1．正常胃组织中存在着抑癌基因RASSFlA表达，胃癌组织该基因表达量 显著性降低，不同分化程度和临床分期，RASSFlA的表达存在明显差 异，RASSFlA的表达可作为评估胃癌恶性程度和预后的一项有意义的 指标。 2． 胃癌细胞中RASSFlA存在缺失表达，启动子区高甲基化为其异常的主 要机制，去甲基化剂5-Aza．CdR可以逆转并恢复基因的再次表达。 3．去甲基化剂5-Aza．CdR可明显抑制胃癌细胞的生长活性，对细胞周期无 显著影响，具体作用机制尚不清楚。 4．去甲基化剂5-Aza-CdR可显著增强化疗药物顺铂、氟脲嘧啶对胃癌细胞 的杀伤作用，．联合应用为胃癌的治疗方式提供了一个新的思路。 5．去甲基化剂5-Aza-CdR恢复胃癌细胞抑癌基因表达的作用具有一定的可 遗传性。 关键词：胃癌细胞甲基化5．氮杂一2’．脱氧胞苷RASSFlA基因化疗 4 I-海第=E}}^拳博±论X 蕾r甲羞化荆对一癌RASSFiA裹选蕊生物攀行为的影响 RASSFlA of onthe of Effects expression demethylatingagent lines and ofhuman carcinomacell gene growth gastric Abst