常压高浓度氧对新生鼠血小板cd62p表达及脑和肺sod、mda的影响.pdfVIP

常压高浓度氧对新生鼠血小板CD62P表达及脑和肺SOD、MDA的影响 本实验拟通过建立常压高浓度氧氧中毒的新生鼠模型，用流式细胞仪检测其 全血中血小板膜糖蛋白CD62P的表达，并检测其脑组织和肺组织的SOD和MDA 的含量，探讨氧自由基及血小板活化在高氧损伤中的作用机制，为临床合理用氧 及防治氧中毒提供实验依据。 方法 1．正常健康出生12d时内的昆明小鼠分成高氧组和对照组，每组5窝，每窝 8R。高氧组置于密闭氧箱中，持续输入氧气，氧浓度大于或等于90％，钠石灰 吸收二氧化碳。温度，湿度恒定。每天定时开箱1小时，添加水、饲料及更换垫 料。对照组的小鼠置于同一空气中，饲养方法与高氧组相同。 1：9抗凝，流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白CD62P的表达。 3．断头处死后的新生鼠，完整剥离脑组织和肺组织后，取右侧脑组织及右肺 组织制作脑匀浆和肺匀浆，于．30。C冰箱保存待测。最后脑和肺组织匀浆用黄嘌 呤氧化酶法测定SOD，硫代巴比妥酸法测定MDA。 4．左肺和左脑置于10％福尔马林液中保存固定，经脱水、石蜡包埋、切片及 HE染色光镜下观察组织学的改变。 结 果 1．高氧对新生鼠一般状况的影响 新生鼠高氧暴露5天后，有的新生鼠随着每日开箱后氧浓度的下降开始逐渐 出现呼吸急促，皮肤苍白和不同程度的发绀等表现，这些改变出现的时间和表现程 度因个体而不一，但在恢复高氧后基本可缓解。随着高氧暴露时间的延长，越来越 多的新生鼠出现这些离高氧后的异常表现并且程度逐渐加重，严重者在7～10天 后出现头颤，发绀加重，甚至出现下颌式呼吸，恢复供氧后，上述症状虽可有所缓解， 但仍表现出活动少反应差，精神萎靡，毛发欠光泽，吸吮能力差等。而对照组新生鼠 则活动好，反应灵敏，肤色红润，毛发光泽，无以上异常表现。 2．肺的病理改变 高氧组新生鼠在高氧吸入后1天时肺组织与空气组无明显差另tl；3天时可见小 儿 常压高浓度氧对新生鼠血小板CD62P表达及脑和肺SOD、MDA的影响 血管扩张、充血和肺泡内少量出血，以中性粒细胞为主的渗出、问质内细胞增多；7 天时仍可见肺泡内出血、间质水肿、炎症细胞浸润、间质细胞明显增加，有的表 现为肺间隔变薄，有的肺组织正常结构局灶性破坏致肺结构紊乱，同时发现终末气 腔明显扩张、小肺泡数量减少，提示肺的正常分化发育受阻；14天,}1321天间隔更薄， 小灶或多灶状实变，肺组织正常结构破坏，终末气腔扩张更为明显、小肺泡数量更 少。 3．脑的病理改变 高氧组各时间点处死的大鼠脑外观与对照组相比无明显充血、水肿、出血、 萎缩等异常变化。光镜下：1天高氧组和对照组无明显差别。3天高氧组与对照 组相比，高氧组脑毛细血管出现明显的扩张充血，有大量红细胞浸润，脑血管周 围间隙增宽，有大量炎细胞浸润。光镜下脑组织较疏松，呈海绵状结构，细胞核 旁空间变宽，过量液体堆积于胞内或细胞间，可见脑细胞间隙增宽。并且随吸氧 时间延长，病理切片示脑损伤加重。7天高氧组发现脑细胞坏死，并出现小胶质 细胞结节。14天和21天高氧组病理损伤加重，细胞坏死明显。 4．月市组织中MDA含量及抗氧化酶SOD活性的动态变化 吸氧1天，高氧组MDA水平(29．83土6．19 nmol／mg)虽高于对照组(25．634-5．54 nmol ／mg)明显高于对照组(22．384-4．36maaol／rag)，有显著性差异(PO．05)；吸氧7天，高 nmol 氧组MDA水平达高峰(93．864-13．94nmol／rag)，并持续至14天(85．364-10．54 nmol／mg)虽明显下降，但其含量仍高于对照组 ／mg)；至吸氧2l天(48．654-7．19 (26．13士4．12 nmol／mg)，差异有显著性(PO．05)。随吸氧时间的延长，高氧组与 对照组SOD的活性均逐渐增