Bradford蛋白浓度测定试剂盒 - 威格拉斯生物技术.PDF

威格拉斯生物技术（北京）有限公司 Bradford蛋白浓度测定试剂盒 (Bradford Protein Assay Kit) 产品说明： Bradford试剂检测蛋白浓度，是目前很常用的蛋白测定方法。该方法具有反应快速、 灵敏的特点。蛋白测定的线性范围在0.5μg~8μg BSA （200μl微量测定），适合于微 量测定和常规方法。 产品内容与储存方法： 名称 数量 保存条件 5x Bradford Reagent 60 ml 4℃ BSA ( 2mg/ml ) 1ml -20℃ 可进行300次常规测定，1500次微量测定。常温运输，4℃保存。有效期12个月。 操作方法： 1) 蛋白标准品作系列浓度稀释，浓度范围可设定在25μg~500μg/ml，或涵盖样品估计 浓度的一定范围。稀释液可用生理盐水或PBS 。测定样品也可作2~3个稀释浓度。 用稀释液作空白对照。 2) 根据测定数量的不同，按1/4比例混合5x Bradford Reagent和蒸馏水，配制成工作液 1x Bradford Reagent。 3) 微量测定法： 96孔板各孔中加入20μl不同浓度的蛋白标准品和待测样品，以及空白对照。每孔 加入200μl工作液。振荡混匀。 在酶标仪上测定595nm波长（或540~610nm波长）下的吸光度。 根据蛋白标准品浓度和吸光度，制作蛋白浓度标准曲线。从标准曲线和样品稀释 倍数计算样品的蛋白浓度。 4) 常规测定法： 标记一系列试管，每管中加入100μl不同浓度的蛋白标准品和待测样品，以及空白 对照。每管加入1ml工作液。振荡混匀。 在分光光度计上测定595nm波长（或540~610nm波长）下的吸光度。 根据蛋白标准品浓度和吸光度，制作蛋白浓度标准曲线。从标准曲线和样品稀释 倍数计算样品的蛋白浓度。 Bradford蛋白浓度测定的干扰因素： Bradford蛋白浓度测定的显色反应受许多去污剂的影响。应避免使用SDS, Triton X-100, Tween等溶解蛋白样品。对于难溶解的蛋白样品，可用1N NaOH溶解和稀 释。 Bradford蛋白浓度测定的显色反应依赖于蛋白中精氨酸残基的数目，因此不同蛋 白间测定的差异可能较大。 电话：（010 （010 传真：（010 网址： 电子邮件：runon@