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2013 年 第 58 卷 第 12 期： 1140 ~ 1146 《中国科学》杂志社 自然科学基金项目进展专栏 进 展 SCIENCE CHINA PRESS 一种新型以碳为中心的醌酮自由基的检测和鉴定 * 朱本占, 夏海英, 覃浩, 单国强, 黄春华, 任福荣, 邵杰, 曲娜 中国科学院生态环境研究中心, 环境化学与生态毒理学国家重点实验室, 北京 100085 * 联系人, E-mail: bzhu@ 2012-07-31 收稿, 2012-10-31 接受 国家杰出青年科学基金、国家自然科学基金重点项目、国家重点基础研究发展计划(2008CB418106)和中国科学院 “百人计划”资助 摘要 最近发现卤代醌能通过不依赖于金属离子的途径促进氢过氧化物的分解而产生羟基或 关键词 烷氧自由基, 并认为该反应通过亲核取代形成醌-过氧化物中间产物, 随后均裂分解生成羟基 碳为中心的 或烷氧自由基和醌氧自由基中间体. 然而, 在先前的研究中, 无论是对其主要反应产物, 还是 醌酮自由基 对该机制中提出的醌-过氧化物中间体和醌氧自由基, 都没有被完全分离鉴定. 在最新的研究 共振异构体 酮-烯醇互变 中, 以 2,5- 二氯-1,4-苯醌(DCBQ)与叔丁基过氧化氢(t-BuOOH)反应体系为研究对象, 通过半 制备高效液相色谱(HPLC), 分离纯化出一种主要反应产物, 采用多种分析方法鉴定该产物为 2-羟基-3-叔丁氧基-5-氯-1,4-苯醌(CBQ(OH)-O-t-Bu), 原来该物质是先前假设的醌-过氧化物 中间体(CBQ-OO-t-Bu) 的重排异构体. 继而发现, 自旋捕获剂DMPO(5,5- 二甲基-1- 吡咯啉-N- 氧化物) 能抑制CBQ(OH)-O-t-Bu 的形成, 同时伴随着形成一种新的含有一个氯原子、质荷比 m/z 为268 的DMPO 加合物. 在此基础上, 综合采用电子自旋共振、核磁共振-氢谱、高效液 相-傅里叶变换离子回旋共振等分析方法, 并使用O-17 标记的H O 的研究表明: DMPO 捕获 2 2 的并不是以氧为中心的醌氧自由基(CBQ-O•), 而是其共振异构体—— 一种以碳为中心的醌酮 自由基(•CBQ=O). 这是第一次检测到一种新型的以碳为中心的醌酮自由基, 为先前提出的卤 代醌介导的不依赖金属离子的氢过氧化物的分解机制提供了直接的实验证据, 并丰富和完善 了该机制. 卤代醌类物质是一类具有强烈肝毒性、肾毒性以 引发脂质过氧化或进一步分解产生不饱和醛基化合 及致癌性的有毒有害化合物, 常作为一类活性中间 物, 进而导致 DNA 和其他生物大分子损伤[9]. 过氧 产物在卤代芳香持久性有机污染物的各种化学与酶 化氢在生物体内可自发产生. 环境因素如紫外线和 反应的氧化及降解过程中产生[1~8]. 最近在饮用水中 环境污染物可促进过氧化氢的生成. 羟基自由基被 检测到了 4 种潜在致肾癌的多卤代醌 2,6-二氯-1,4- 公认是生物系统中最具活性的活性氧物质, 能直接 苯醌、2,3,6-三氯-1,4-苯醌、2,6-二氯-3- 甲基-1,4-苯醌 与生物大分子反应导致氧化损伤[3,4,9]. 目前,