变异山羊绒纤维二级结构的拉曼光谱分析要点.PDFVIP

AID-application note 变异山羊绒纤维二级结构的拉曼光谱分析 【本文作者：分析仪器事业部 （AID ）应用研发部张丽文工程师】 1 引言： 山羊绒是毛纺工业的高档原料，素有 “软黄金”之称。我国羊绒产量居世界首位，生产全球大约75% 的山羊绒，是羊绒生产 与加工大国，在国际羊绒产业占据着重要地位。近年来山羊绒逐渐产生了变异分为羊毛纤维、两型毛纤维、二细毛纤维、以及羊 绒纤维。山羊绒变异后特别是代表优质山羊绒的特性指标- 细度增加，为洗毛、分梳、染色等加工工艺带来了困难，这些问题已 经影响到了山羊绒制品质量，影响到了山羊绒的加工性能和制品的出口，给我国山羊绒产业带来了严重的负面影响。 山羊绒变异后表面与内部结构均发生改变，化学性质也有所不同，为更高效、准确地区分毛与绒，不仅需要从纤维的粗细、 质量的轻重、表面鳞片、手感等方面综合分析变异山羊绒纤维的结构，还需要对表面与内部的物质结构进行深入研究。在结构表 征方面，从20 世纪70 年代就有蛋白质二级结构表征方面的研究报道，但实现定量分析仍具有一定难度，这就需要采用新的表征 手段。本公司采用拉曼光谱分析技术探究四种变异山羊绒纤维的蛋白质二级结构，具有高分辨率、高灵敏度、无损伤、不接触样 品等性能，以及样品用量少、无需样本处理、测试时间短等优势，已经成为新一代表征分子结构的技术手段。 2 技术优势 拉曼光谱分析技术是依据散射光来获得物质信息的分子光谱技术，是由于晶格振动、电荷密度起伏、自旋密度起伏、电子跃 迁以及它们的耦合等因素引起的。当一束单色光照射到样品上后，分子可以使入射光发生散射。大部分光只是改变方向发生散射， 而光的频率仍与激发光的频率相同，这种散射称为瑞利散射 ；少部分光不仅改变了光的传播方向，而且散射光的频率也改变了， 不同于激发光的频率，称为拉曼散射。散射光与入射光之间的频率差v 称为拉曼位移，拉曼位移与入射光频率无关，它只与散射 分子本身的结构有关。拉曼散射是由于分子极化率的改变而产生的。拉曼位移取决于分子振动能及的变化，不同化学键或基团有 特征的分子振动，ΔE 反映了指定能级的变化，因此与之对应的拉曼位移也是特征的。这是拉曼光谱可以作为分子结构定性分析 的依据。 激光显微拉曼光谱仪是集光谱学、化学计量学、探测技术以及计算机技术为一体的高新技术，具有样品用量少、无样本处理、 无损伤、无接触、测试时间短、重复性好等优良性能，可以对绝大多数的有机、无机化合物进行无损表征。变异山羊绒纤维属于 蛋白质纤维，激光显微拉曼光谱技术在研究变异山羊绒纤维具有以下优势:1 ）无损伤检测，不破坏纤维结构 ；2 ）灵敏度高，谱峰 信息丰富 ；3 ）拉曼光谱可以表征蛋白质的二级结构，如，胱氨酸、肽键中的酞胺Ⅰ带和酞胺Ⅲ带等信息 ；4 ）变异山羊绒纤维具 有非极性功能基团、芳香族氨基酸的强谱带。 3 实验仪器 样品 ：4 种变异山羊绒纤维 试验设备 ：北京卓立汉光仪器有限公司研制的 “Finder Vista”显微共聚焦拉曼光谱 仪系统 ；532nm 激发光源进行激发 ；积分时间为3s ，扫描尺寸为100X 物镜。 4 数据分析 在一定条件下，拉曼特征峰强度与待测物浓度成正比，但是，激光功率、测量参数、外界环境等对拉曼特征峰强度均具有一 定影响，因此，不能利用拉曼的绝对强度判断物质的含量。变异山羊绒纤维1450cm-1 波数的拉曼特征峰主要由氨基酸侧链上CH2 和CH3 的弯曲振动引起，不受肽链主链构象变化的影响。为比较变异山羊绒纤维的拉曼强度差异，选该谱带为内标，采用峰面积 比法，分析变异山羊绒纤维表面与内部纵向剖析的拉曼光谱特征 对于变异山羊绒纤维的蛋白质二级结构的拉曼光谱特征峰，根据已有文献，可以解释酰胺带、S-S 键带、酪氨酸、胱氨酸等 谱峰带的信息。 覆盖全国的销售服务网络为客户提供及时的技术支持和周到的服务： 北京总公司：北京市金桥产业基地联东 谷中试区 （ ） 电话： U 68B 101102 010 上海：021深圳：0755成都：028西安：029