有机溶剂对黑根霉甾体11_羟基化的影响.pdf

　第 38 卷 第 2 期 工 业 微 生 物 　Vol . 38 No . 2 　 　2008 年 4 月 Industrial Microbiology Ap r . 2008 α 有机溶剂对黑根霉甾体 11 羟基化的影响 周浩力 , 　张妍 , 　卢文玉 , 　闻建平 (天津大学化工学院 ,天津 300072) α α α 摘 　要 　　考察了有机溶剂对黑根霉甾体 11 羟基化反应中转化底物 16 , 17 环氧孕甾酮生成 α α α 11 ,16 ,17 环氧孕甾酮的转化率和细胞色素 P450 酶浓度的影响 。向培养 28 h 的培养液中添加 终浓度 0 . 035 molL 的丙酮和 1. 75 gL 的底物 ,继续转化 48 h 。与未添加丙酮相比,添加丙酮后的 底物转化率和细胞色素 P450 酶表达量分别提高了 6 . 8 %和 30 % 。说明丙酮添加可明显提高黑根 α 霉甾体 11 羟基化能力和细胞色素 P450 酶的表达 。 关键词 : 有机溶剂 ; 　黑根霉 ; 　转化率 ; 　细胞色素 P450 ( ) 　　1952 年 Murray 和 Peter son 在温和的条件下 , 　　黑根霉 R hiz op us nig ricans J128 , 由天津津津 α α α ( 利用黑根霉羟化孕甾酮得到 11 羟化产物 ,从此微 药业有限公司提供 ; 16 , 17 环氧孕甾酮 沃氏氧化 生物转化技术在甾体药物生产中的重要性被广泛认 ) α α α 物 ,11 , 16 ,17 环氧孕甾酮均由天津津津药业有 [ 1 ] α α 识 。利用微生物菌种催化甾体底物 16 , 17 环氧 限公司提供 ; 甲醇和乙腈为色谱纯 ;其它试剂为分析 ( ) α 孕甾酮 沃氏氧化物 进行 11 羟基化反应 , 已经成 纯 。 为当前甾体药物微生物转化的重要反应之一 。 1. 2 　实验方法 α 　　目前 , 国内外报道了多种可以催化甾体 11 羟 1. 2 . 1 　甾体底物悬液的配置 基化反应的霉菌如赫曲霉 ,烟曲霉和犁头霉等[2 ,3 ] 。 α α μ 　　16 ,17 环氧孕甾酮过 45 m 分子筛 ,取 1 g 加 黑根霉 , 由于具有不产红色素以及产物便于分离等 入 8 mL 水 ,0 . 035 g 洗衣粉 ,制成底物悬液 ,加热煮 优点 ,被广泛采用 。黑根霉进行羟基化反应的关键