Chapter 1绪论 and 2细胞破碎.ppt

生物分离工程　 主讲：张媛媛 MPEmail:zyy800928@qust.edu.cn 本课程教材及参考书目 本课程的主要内容 1 绪论 2 细胞分离与破碎 3 初级分离 4 膜分离 5 萃取 6 吸附分离技术和理论 7 液相色谱 8 亲和色谱 9 电泳和电色谱 第一节 生物技术与生物分离 　 ?生物技术（biotechnology) 有机体的操作和应用有机体生产有用物质、改善人类生存环境的技术 　?生物技术的主要目标：生物物质的高效生产 ?生物分离的基本概念????　从生物材料、微生物的发酵液、生物反应液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关产品（如具有药理活性作用的蛋白质等）的过程，称为生物分离，又称下游加工过程。 ?生物下游加工在生物技术中的地位 第二节 生物物质和生物分离 ?生物物质种类（按分子量大小分类） 小分子（Mass 1000D）：抗生素、有机酸、多肽类、脂类、氨基酸等 生物大分子（Mass 1000D）：酶、抗原、抗体、多肽、蛋白质类 超大分子（ Mass 106-107）：病毒、质粒DNA等 细胞及生物体组织：疫苗、菌苗、胎盘组织液 ?生物物质种类（按发酵时目的产物所在的位置分类） cell内产物：胰岛素、白细胞介素、干扰素、重组蛋白质（大肠杆菌表达）、胞内酶 cell外产物：抗生素（青霉素、红霉素）、胞外酶（α-淀粉酶）、重组蛋白（酵母菌、动物细胞表达）等 ?常见的生物产品 氨基酸、酶类、多肽、蛋白质、核酸、多糖、脂类、有机酸等 ?生物物质的用途 生物药物、功能食品和添加剂、饲料、化妆品、精细生化产品、大宗生化产品、生物能源 ?生物产品的特点　 （1）目标产物稳定性差，易导致生物活性的降低甚至丧失（a pH , 温度; b 酶作用， 染菌） （2）生物材料组成复杂，目标产物与其类似物常法难分离 （3） 原料液中目标产物的浓度一般都很低，杂质含量却很高 （4） 对目标产物的质量要求高 （药品） ?生物分离过程的一般流程： 第三节　生物分离过程的特点 　（1）活性：须设计合理的分离过程和操作条件，实现目标产物的快速分离纯化，获得高活性目标产品； 　（2）安全性：须除去有害人类健康的物质（如热原及具有免疫原性的异体蛋白等）并防止其从外界混入； 　（3）纯度：须优化设计分离过程和各分离操作，采用高效分离纯化技术，以除去难分离杂质（包括目标产物类似物及其异构体）； 　（4）浓度：需对原料液进行高度浓缩，以致下游加工过程的成本显著增大。 第四节 生物分离技术和原理 ?溶质分离的本质： 有效识别混合物中不同溶质间物理、化学和生物学性质的差别，利用能够识别这些差别的分离介质和（或）扩大这些差别的分离设备实现溶质间的分离或目标组分的纯化。 物质的性质包括以下几个方面： ? 物理学性质 1)力学性质：密度、大小、形状（重力沉降、离心、过滤、膜分离） 2) 热力学性质：溶解度、挥发度、表面活性、相间分配平衡（萃取、结晶、沉淀、泡沫分离、吸附和离子交换） 3）传质性质：粘度、分子扩散和热扩散（应用少） 4）电磁性质：荷电性质、电荷分布、等电点、磁性（电泳、电渗析、离子交换、电色谱） ?化学性质 利用化学反应进行分离（化学吸附和化学吸收） ?生物学性质（生物分离特有的） 生物分子间的分子识别作用、立体选择性（亲和色谱、手性分子的修饰） ?生物分离技术的分类 平衡分离 差速分离 ? 生物分离操作的策略 1)需利用基于不同原理的多步分离操作的串联或组合 2) 平衡分离技术（萃取、沉淀等）多采用多级分离操作提高分离效率。（差速分离如膜分离亦可） 3) 需根据目标产物性质和共存杂质的性质选择最佳分离方法 （高纯度、高收率、低成本） 第五节 生物分离效率 分离效率可从两个方面来评价： ?　分离方法和设备 ?　分离过程和产品 ?对分离方法和设备的评价指标 （针对特定分离方法或设备：离心、膜分离、萃取、色谱） 分离容量（capacity) 单位体积的分离设备（或分离介质）处理料液或目标产物的体积或质量 分离速度(speed) 单批次分离所需时间，或连续分离过程的进料速度，批次时间越短，分离速度越快 分辨率(resolution) 目标产品的纯化效果或杂质的去除能力 ?对分离过程和产品的评价指标 浓缩程度 分离纯化程度　 回收率 分离纯化程度 用分离因子（seperation factor) ?表达, 又称分离系数 。 回收率：目标产物回收的比例 ?生物分离工程研究的根本任务 1）分离方法、分离介质和设备 2）设计和优化分离过程，提高分离效率，减少分离步骤，缩短分离时间，实现高纯度，高收率，低成本的分离目标 第