青蒿素衍生物治疗脑神经胶质肿瘤的实验研究.pdfVIP

的稳定结合。用药物将神经胶质瘤细胞控制在不同的生长期，然后测试对青蒿素的 敏感性，发现青蒿素对各周期均有作用，但对分裂期(M期)的细胞作用较强。 ，： 青蒿素能对肿瘤细胞产生特异选择性作用的原理是很值得探讨的课题。一个较 有根据的学说认为青蒿素对肿瘤细胞产生特异选择性作用的原因与其抗疟作用类 似，与细胞内的高铁环境有关。肿瘤细胞由于高速分裂的需要，铁的浓度比一般的． 细胞显著增高，无活性的青蒿素在高铁环境下内过氧桥打开而形成具较强细胞毒性 的氧化态，对细胞起杀伤作用。但是，青蒿素形成氧化态后的作用靶点尚不明了。 国外有研究用三维立体分子模型模拟青蒿素与其作用靶点蛋白质的结合方式，提示 青蒿素结构中的过氧桥在裂解开环后，与靶点蛋白的巯基发生共价键结合而使其失 去功能。根据这一线索和本研究观察到的青蒿素作用在细胞分裂期，引起细胞凋亡 等特性，本课题研究了青蒿素对神经胶质瘤细胞2号氯离子通道的影响。2号氯离 子通道是与细胞分裂、细胞的体积调节和电解质调节有密切关系的蛋白质。它存在 于神经胶质细胞的细胞膜，在癌变时表达量增高。它的调节亚基在分子结构上有连 续排列的多个巯基，有可能成为青蒿素的一个作用靶点。本研究用膜片钳方法观察 到青蒿素能抑制神经胶质瘤细胞氯离子通道的电流，再经蛋白质免疫印迹凝胶电泳， 证实青蒿素能降低2号氯离子通道蛋白质在神经胶质瘤细胞膜的表达水平，使细胞 膜氯离子通道的数目减少。目前尚未发现任何药物能选择性地降低2号氯离子通道 蛋白质在神经胶质瘤细胞膜表达水平，青蒿素在这一领域有深入研究的价值。 为了观察青蒿素在整体动物身上是否有作用，进一步接近临床治疗，本课题制 作了颅内神经胶质瘤动物模型。颅内注射将神经胶质瘤细胞接种到CBA纯种小白 鼠的脑组织，并在动物颅骨钻孔安装记录电极，十天后用脑电图出现异常放电和脑 切片出现结构损害来判别肿瘤的形成。移植肿瘤细胞后，每天腹腔注射lOmg／kg双 氢青蒿素，初步观察到双氢青蒿素对正常脑组织没有显著影响，而肿瘤脑组织的病 理切片经细胞凋亡检测试剂染色呈阳性，说明青蒿素能透过血脑屏障而到达颅内肿 瘤组织，引起肿瘤细胞发生凋亡。为青蒿素在整体水平上有治疗脑肿瘤的作用提供 了更直接的证据。 2 综合上述实验结果，本课题观察到青蒿素对大脑神经胶质瘤细胞具有选择性杀 伤作用，对肿瘤杀伤的选择性可能与青蒿素在肿瘤细胞高铁环境下形成氧化态，进 而抑制氯离子通道有关。同时，动物模型上初步观察到了青蒿素能透过血脑屏障到 达脑组织肿瘤部位，引起神经胶厦瘤发生细胞调亡的作用，显示了青蒿素在临床上 治疗脑肿瘤方面取得突破性进展的潜力。 关键词：青蒿素，神经胶质瘤，细胞凋亡，氯离子通道，膜片钳，脑神经胶质 瘤动物模型 Effectof Artemisininon Astrocytoma Abst．r．act： ． Braintumorisamassofcells inthe growing braintumor abnormallybrain．Malignant grows andislife than rapidly twohundredthousands threatening．More are people each withbrain diagnosed involves year