液相色谱填料基质的发展.docVIP

高效液相色谱的填料可分为无机基质填料和有机基质填料，无机基质填料包括硅胶、氧化铝、氧化锆、羟基磷灰石、氮化物以及活性碳等。此外还有复合物材料，即通过精细调控技术制备的无机-有机球杂交基球，经化学衍生后，制备得对药物分析和筛选很有用的高效、可耐pH2～8、低吸附性的新型填料。 1、硅胶 无机基质材料中最重要的是硅胶，微粒型硅胶的出现，促进了高效液相色谱法的发生与发展。合成色谱用硅胶区别于天然晶体二氧化硅，也区别于介于晶型和无定型之间的用于色谱、电色谱中的石英毛细管，用作色谱填料的是无定型二氧化硅。硅胶吸附色谱是色谱中的经典，硅胶至今仍是制备色谱中填充柱的主要材料，250目～400 2、氧化铝 用作吸附材料和色谱填料基质的氧化铝主要是γ-氧化铝，γ-氧化铝表面化学修饰比硅胶更困难，因此氧化铝多使用于一些小分子有机化合物的分离，用于正相、离子交换色谱和反向高效液相色谱中，在生化分离上应用得少。氧化铝的化学修饰可通过铝羟基的反应或是涂覆技术。通过铝羟基反应可通过在氧化铝表面上的活性羟基键合C4、C8和C18等烷基，制得在宽pH范围内稳定，应用于反相色谱中的烷基化氧化铝。表面涂覆可以制得聚苯乙烯- 二乙烯基、聚丁乙烯或十八烷基硅烷等强疏水性复合材料。 在吸附型制备色谱中 ，氧化铝的吸附能力比硅胶更强，氧化铝比硅胶的样品处理量更大，根据含水量大小（0%～15%），大多情况下，需要控制的含水量为6%～10%，对应的活性为第三和第四等级。根据酸碱性，应用于吸附色谱中的氧化铝分为中性、酸性和碱性氧化铝，中性氧化铝水提取液的pH值为7. 5，适用于醛、酮、醌、某些苷及酸碱溶液中不稳定化合物，如酯、内酯等化合物的分离，因此应用十分广泛。大多数情况下使用的是碱性氧化铝水提取液的pH值为9～10常应用于碳氢化合物的分离，常应用于碳氢化合物的分离，。4、复合型填料 复合型填料，一般而言，硅胶基质化学键合相在pH 2～8的范围内稳定，难以耐受更宽的pH范围，在碱性条件下硅胶基质会发生溶解，于是人们将机械强度较低、在有机溶剂中易发生溶胀的高聚物引入到硅胶基质填料中，与硅胶形成优势互补，制备出有机-无机复合型填料，即包覆型填料或涂覆型填料。硅胶、氧化铝、氧化锆等都曾被用作包覆型填料的基质材料，其中最重要的是硅胶和氧化锆。用于包覆无机基质填料的高聚物则有聚苯乙烯、聚乙基苯乙烯-二乙烯基苯、聚丁二烯、聚环氧乙烷、聚硅氧烷、琼脂糖、聚氯甲基苯乙烯-二乙氧基甲基乙烯基硅烷以及气相沉积碳等。 早期包覆型填料的制备采用物理包覆法，制得的复合物孔径结构不甚可控，重现性差。后期采用的是化学键合或复合型包覆法。该法首先利用无机基质表面修饰技术，使硅胶、氧化铝或氧化锆等基质的表面带上适合数量的活性基团，例如可发生加合反应的双键、环氧基团、氨基或羧基等，再将制备高聚物所需的单体、交联剂等涂覆到基质表面，然后通过加入引发剂，控温等条件引发化学键合或共聚反应，制得包覆层紧密牢固的复合色谱填料。但是由于聚合物包覆不完全，裸露出来的无机基质会吸附路易斯碱性物质，特别会吸附蛋白质而导致峰型变差，这种吸附可以通过有机物热蒸汽化学气相沉积法使热解碳对裸露无机基质进行包覆。在键合固定相中特别值得提及的是用于手性拆分药物、酸类、酰胺类化合物的手性分离固定相。手性固定相所使用的高分子基球通常是粒径单分散的缩水甘油甲基丙烯酸- 亚乙基二异丁烯酸酯共聚物微球、一锅法制备的单分散聚甲基丙烯酰胺球、聚硅氧烷、光学活性聚氨基甲酸乙酯以及聚苯乙烯。通过共价键或涂覆方式，发展了Pirkle型（刷型）、多糖类、环糊精类、冠醚类、杯芳烃等多种类型的手性固定相。 5、石墨化碳填料 硅胶的化学稳定性较差，仅能在pH=2~8的环境下工作。但是，在很多场合下，需要使用极端的pH条件。为此，人们曾大力发展高分子微球、氧化铝、氧化锆等化学稳定性更好的基质材料。但是，很难有一种材料能全面地满足液相色谱基质的要求。例如，高分子微球在有机溶剂中会发生一些溶胀，因此难以应用于以含有机溶剂的流动相进行梯度淋洗的场合；氧化铝和氧化锆与硅胶相比，虽然化学稳定性较好，但其表面修饰与键合比较困难。因此，化学稳定性好的碳材料便很自然地被考虑作为色谱填料的基质。 碳材料有极好的化学稳定性，可耐受宽达pH=1~14的环境；耐高温，石墨化碳可耐3000以上的高温而不受破坏；经适当加工的碳材料可具有很好的机械强度，具有优良的导电性、导热性及电磁屏蔽特性。更为难能可贵的是，多孔性碳材料以其结构的特点而具有很好的吸附性及选择性。正是碳材料的这些特性，使人们期待它在色谱领域中能有特殊的用途。