核酸的分离.PPTVIP

课程简介 教学要求 通过教学，要求学生掌握分子生物学与基因工程的基本理论，巩固所学的理论知识； 使学生了解科研工作的基本思路，学会如何设计实验，如何分析实验，培养分析问题和解决问题的能力； 培养和训练学生的基本实验技能，培养学生的独立工作能力和创造能力。 掌握基因重组的基本过程，如：核酸DNA、RNA和质粒DNA提取、酶切、连接、转化及重组子的酶切鉴定等技术。 掌握外源基因的表达技术和蛋白质电泳分析技术，蛋白质提取、分离和纯化技术。 掌握真核生物基因组DNA的提取的基本原理。 提取高质量基因组DNA的主要用途： PCR扩增的模板 用于构建基因组文库 用于Southern blot 杂交分析 DNA Extraction 从外周血提取基因组DNA的步骤 PROCEDURE OF DNA EXTRACTION FROM BLOOD.doc RNA 分离的关键因素是尽量减少RNA酶的污染！ 如何创造一个无RNase的环境 ？ 极力避免外源RNase的污染：主要来源于操作者的手、实验的器皿和试剂 尽力抑制内源性RNase的活力：主要来源于样品中的组织细胞。 Acid-guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform RNA purification (after Chomczynski and Sacchi, 19