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白花蛇舌草对正常器官氧化损伤防护效应的实验研究论文.doc
白花蛇舌草对正常器官氧化损伤防护效应的实验研究论文
【摘要】 目的 探讨白花蛇舌草对经抗肿瘤药物治疗的荷瘤小鼠正常器官氧化损伤的防护效应及机制。方法荷瘤鼠随机分为3组:对照组,不给予任何治疗继续饲养至实验结束;单纯化疗组,单次腹腔注射顺铂(DDP)或阿霉素(ADM);化疗+白花蛇舌草组,单次腹腔注射DDP或ADM,并给予白花蛇舌草水煎液灌胃,连续应用7天。 化学比色法测定荷瘤小鼠肝脏、脾脏、肾脏和骨髓组织的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,电镜下观察脾脏超微结构变化。结果 化疗+白花蛇舌草组小鼠肝、脾和骨髓组织的ROS、MDA水平和GSH-Px、CAT活性较单纯化疗组明显降低(P 0.01),脾脏超微结构变化明显减轻。结论 白花蛇舌草具有抗氧化损伤作用.freelal tissues induced by antitumorous drugs in tumor-bearing mice. Methods The contents of reactive oxygen species (ROS) and malondialdehyde(MDA) and the activities of glutathione peroxidase (GSH-Px) and catalase (CAT) in tissue homogenates ined by chemocolorimetry. Electron microscope al tissues of tumor-bearing mice treated otherapy. Hedyotic diffusa also lessened the ultrastructural injury of spleen. Conclusion Hedyotic diffusa has protective effects against oxidative injury of normal tissues induced by antitumorous drugs in tumor-bearing mice.
Key alondialdehyde; glutathione peroxidase; catalase
抗肿瘤药物可通过刺激肿瘤细胞产生高浓度活性氧(ROS)来诱导细胞凋亡,也可导致机体正常组织的损伤,尤其细胞增殖速率较高或(和)药物代谢所在的组织(骨髓、胃肠上皮、肾脏、肝脏等),这些毒副作用限制了抗肿瘤药物用药剂量,或在获得疗效之前不得不中断治疗,将严重影响患者的疗效[1]。白花蛇舌草系茜草科耳草属植物,性味苦、甘、寒,含有丰富的有机锗、黄酮、多酚、果酸、多糖等化合物。文献报道白花蛇舌草具有抗氧化作用和增强机体免疫功能的作用[2-3]。为此,本实验进行白花蛇舌草对经化疗荷瘤小鼠导致正常器官氧化损伤的防护效应的实验研究,这将为白花蛇舌草制剂临床抗肿瘤治疗提供更多资料。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 健康BALB/c小鼠30只,6~8周龄,体重(20±2) g,由上海实验动物中心提供;U14宫颈癌腹腔积液型,由上海医药工业研究院实验动物中心提供。
1.1.2 药品 白花蛇舌草200 g加蒸馏水2000 ml温火煎煮2 h,去渣浓缩为200 ml备用。抗肿瘤药物顺铂(DDP)(山东德州制药厂,批号:020902),阿霉素(ADM)(浙江海正药业股份有限公司,批号:002204),足叶乙甙(VP-16)(江苏恒瑞制药有限公司,批号:021211)。ROS、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)测定盒,南京建成生物有限公司。
1.2 方法
1.2.1 肿瘤动物模型的建立 无菌条件下抽取传代荷瘤小鼠的腹腔积液,以生理盐水稀释,调至细胞浓度约1×1010/L,取细胞悬液0.2 ml,于小鼠左腋下皮下接种。小鼠皮下接种肿瘤细胞后10~14天肿瘤直径约1 cm时开始进行分组实验。
1.2.2 动物分组 将已经形成实体瘤的荷瘤鼠随机分为3组。①对照组:不给予任何治疗继续饲养至实验结束;②单纯化疗组:单次腹腔注射DDP或ADM,用药剂量DDP=2.5·kg-1·1.88·鼠重(kg),ADM=1.25·kg-1·1.88·鼠重(kg)[4];③化疗+白花蛇舌草组:单次腹腔注射DDP或ADM,同时给予白花蛇舌草浓缩液灌胃,0.5 ml/(次·只),1次/d,连续应用10天,同时单纯化疗组等量生理盐水灌胃。每组动物为10只。
1.2.3 标本处理 荷瘤鼠治疗结束后次日,采用颈椎脱臼法处死小鼠,立即取出其肝、脾、肾,置于预先配制预冷的匀浆介质中,各
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