实验一 生物材料采集和制备.ppt

院 系：生化环院 任课老师：吴雨龙 任课班级：09食品、行09食品; 本实验主要学习食品毒理学试验中有关动物试验的基本操作技术，重点掌握实验动物的选择、染毒途径、生物材料的采集和制备等方法。; 实验基本要求：; 实验后： 1.各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室； 2.值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所； 3.书写实验报告。;题目 目的 原理 材料：实验动物，器材，药品 方法：用自己的语言简单扼要描述出来； 结果：要求真实、清楚； 讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果异常或失败的原因；; 随机原则： 使每一实验对象都有同等的机会抽到实验组或对照组中，除处理因素外其他因素尽可能均衡一致，从而抵消非实验因素的影响。 对照原则： 组间对照：阴性对照，阳性对照，同因素不同水平对照； 自身前后对照 重复原则：;动物的选择 小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。 大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。; 豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。 家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温实验，用于热原检查 狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。; 实验动物的标记：; 小白鼠 右手提起鼠尾, 左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部,便可将小鼠完全固定（见图2）。 单手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、无名指和手掌压住尾根部，再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部皮肤而固定（见图3）。; 大鼠 捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。 ; 豚鼠 豚鼠性情温和不咬人，用手握住躯干即可。 家兔 可用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势（见图4-1，4-2）。 在进行仰位手术操作时，可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头部用兔头固定夹固定（见图5-1，5-2）。; 小白鼠 灌胃法（i.g.）：以左手固定小鼠后，使其腹部朝上，颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，在用灌胃器压向后方使动物口腔和食管成直线的同时，使灌胃器沿上颚滑入食道。如方法正确，应无明显障碍。若遇较大阻力或动物剧烈挣扎，必须退出重插，不得用蛮力强行插入灌胃器。否则会刺破食道或气管（见图6）。小鼠灌胃容量一般为0.1-0.3m1／10g。; 小白鼠 腹腔注射(i.p.)：以左手固定小鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取30度-45度角将针头从下腹部向头端视动物大小刺入1-2厘米。进针部位不宜过高，刺入不宜太深，以免伤及内脏。将注射针头回退少量距离，轻轻回抽注射器，如无明显回血、回液即注入药物（见图7，图8）。小鼠腹腔注射量一般为0.1-0.3ml／l0g。;肌肉注射（i.m.）：小鼠因肌肉较少，很少采用肌肉注射，若有需要可注射于股部肌肉，多选后腿上部外侧，一处注射量不超过0.1mL 。; 小白鼠 静脉注射(i.v.)：将小鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾在50℃热水中浸泡半分钟或用白炽灯烘烤使血管扩张。左手拉尾端，选择两侧尾静脉中扩张最明显的，右手持注射器将针头刺入尾静脉。当针头进入静脉时有突破感，随后的推进阻力减小，同时可能有回血。如针头未进入静脉，则无突破感，进针的阻力无改变。推入药液（见图10）。; 家兔 灌胃：需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢。另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头并固定之。取8号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水中，如有气泡吹出，表示插在气管内，此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后，用注射器接通导尿管将药液推入（见图11）。;家兔 皮下、肌肉、腹腔注射：给药方法基本上同小鼠，唯针头可稍大，给药量可稍多。皮下与肌内为0.5-1.0ml/mg，腹腔为1.0-5.0ml/mg。 静脉注射：将家兔置固定箱内，拨