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植物基因工程补充材料 1.密码子codon是指信使RNA分子中每相邻的三个核苷酸编成一组，在蛋白质合成时，代表某一种氨基酸的规律。 信使RNA在细胞中能决定蛋白质分子中的氨基酸种类和排列次序。信使RNA分子中的四种核苷酸（碱基）的序列能决定蛋白质分子中的20种氨基酸的序列。而在信使RNA分子上的三个碱基能决定一个氨基酸。 2.起始密码子为AUG(甲硫氨酸) ， 另外还有UAA、UAG、UGA三个密码子不能决定任何氨基酸，是蛋白质合成的终止密码子。 4.3 ′端非翻译区：成熟的mRNA编码区下游一段不被翻译的序列。在真核生物中它含有在mRNA 3′端添加多腺苷酸的信号。这个序列在mRNA转运、稳定性和翻译调节中起重要作用。 5.外显子：基因组DNA中出现在成熟RNA分子上的序列。外显子被内含子隔开,转录后经过加工被连接在一起,生成成熟的RNA分子。信使核糖核酸(mRNA)所携带的信息参与指定蛋白质产物的氨基酸排列。 6.内含子（intron）:真核生物细胞DNA中的间插序列,或不编码序列,阻断基因线性表达的序列, 这些序列被转录在前体RNA中，经过剪接被去除，最终不存在于成熟RNA分子中。内含子和外显子的交替排列构成了割裂基因。在前体RNA中的内含子常被称作“间插序列”。 内含子不表达为功能蛋白或RNA在转录后被除掉，外显子表达功能蛋白或者RNA。 7.起始密码子(AUG、GUG)：mRNA分子中规定编码多肽链第一个氨基酸的密码子。终止密码子：mRNA分子中作为转译多肽链终止信号的三联体密码子。 起始密码子和终止密码子均位于mRNA分子中，且均只含三个碱基，都与mRNA的转译过程相关。 8.RNA聚合酶（RNA polymerase II，亦被称为RNAP或Pol）是一个存在于真核生物细胞中的酶。它催化核糖核酸转录，合成mRNA及大多数snRNA和微RNA的前体。RNA聚合酶是含12个亚基的550kDa大的复合物，也是RNA聚合酶中被研究得最多的一类。在它结合到基因上游的启动子并开始转录前需要大量转录因子。 旁侧序列中能影响基因表达的序列。顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控。顺式作用元件本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，要与反式作用因子相互作用而起作用。 顺式作用元件是指与结构基因串联的特定DNA序列，是转录因子的结合位点，它 们通过与转录因子结合而调控基因转录的精确起始和转录效率。 顺式作用元件指同一DNA分子中具有转录调节功能的特异DNA序列。包括启动子、增强子等反式作用因子指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 7.转基因问题系列之二：抗虫基因的种类与作用原理 目前的抗虫基因有哪些种类？ ?抗植物虫害的基因有几十种，根据其来源可分为三类： ??一是从微生物苏云金芽孢杆菌分离出的苏云金芽孢杆菌杀虫结晶蛋白基因，简称Bt基因（广泛应用）； ? 二是从植物中分离出的昆虫蛋白酶抑制剂基因，其中应用最多的是豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（CPTI）； ?三是植物凝集素基因（刚刚开始研究应用）。 Bt基因的作用原理是什么？ 苏云金芽孢杆菌是一种孢子细菌，在其芽孢形成过程中，可产生伴胞晶体，它由一种或多种蛋白组成，具有高度特异性的杀虫活性，这种蛋白通常被称为δ-内毒素或杀虫结晶蛋白。 杀虫结晶蛋白通常以没有毒性的原毒素形式存在，当被昆虫取食之后，在昆虫的消化道内，原毒素被活化，转型为有毒性的多肽分子。杀虫结晶蛋白毒性的发挥需要几个步骤： ??? 首先，必须先溶解在昆虫的肠道里，杀虫结晶蛋白只能溶于碱性条件下，而不能溶于中性条件或者酸性条件。 ??? 第二，一经溶解，在专一性蛋白酶水解切割作用下，释放出毒素核心肽段，原毒素被活化成毒素。 第三，活化后的杀虫结晶蛋白不被胰蛋白酶或者其它蛋白酶所破坏，它能与昆虫肠道上皮细胞上面的特异性受体结合，结合之后杀虫结晶蛋白全部或部分嵌合于细胞膜中，使细胞膜产生一些孔道，从而导致细胞由于渗透平衡被破坏而破裂。大多数情况下杀虫结晶蛋白的毒性都来源于它与受体的结合。 伴随着上述过程，昆虫幼虫将停止进食，最终死亡。 杀虫结晶蛋白可分为哪些类型？它们能抗什么虫？ 从大量的Bt菌株中分离出至少90种基因编码的杀虫结晶蛋白，并且作了测序。根据蛋白结构同源性和寄主范围，将这些基因划分为Cry、Cry、Cry和Cry4个主要类型。其中，Cry高抗鳞翅目昆虫，Cry抗鳞翅目和和双翅目昆虫，Cry高抗鞘翅目昆虫，Cry抗双翅目昆虫。最近几年，又相继发现了兼抗鳞翅目和鞘翅目的Bt毒蛋白(Cry)、抗线虫的Bt毒蛋白(Cry)。大多数苏云金芽孢杆菌株系可产生几种杀虫结晶蛋白，每一种杀虫结晶蛋白寄主范围相当狭窄。 杀虫结晶蛋白