vero细胞制备狂犬疫苗概要1.ppt

目 录 什么是狂犬病 狂犬病是一种由狂犬病毒引起的人兽共患急性传染病，潜伏期可以从几天长至数年，患者表现出特有的怕水症状(因此又称“恐水症”)。 病死率高达100%。 全球有100多个国家和地区有狂犬病发生，但主要分布在亚洲、非洲和拉丁美洲等发展中国家，其中98％在亚洲，而中国的发病数仅次于印度，居世界第二位，流行严重。   简介  材料 Vero细胞 微载体 Phamacia Cytodex-1 培养基　Vero细胞培养使用MEM培养基(Gibco),加入10%新生牛血 清;病毒培养液为M199(Gibco),加入1%人血白蛋白, 100U/ml双抗 病毒种子 aG株 实验动物 鼠。鼠龄21 d,体质量11~13 g。 生物反应器 7 L搅拌生物反应器，工作体积为5 L  工艺流程  检定 1.单次病毒收获液 病毒滴定 应不低于6.0LgLD50/ml 2.成品检定 鉴别试验 采用酶联免疫法(ELISA法)检查，应证明含有狂犬病病毒抗原 外观应为澄明液体无异物 3.化学检定 PH值 应为7.2—8.0 效价测定 应不低于2.5IU/剂 细胞内毒素检查 应不高于50EU/剂 牛血清蛋白残留量 应不高于50ng/剂 VERO细胞DNA残留量 应不高于100pg/剂 VERO细胞宿主蛋白残留量测定 采用酶联免疫法测定，应不高于4ug/ml,并不得超过总蛋白质含量的5% 问题： 1.为什么要使残余β-丙内脂水解？（师） 2.为什么疫苗需要防腐剂？ 3.纯化的方式有哪些？ 4. ELISA可用于测定抗原，是否也可用于测定抗体？（其中需要什么试剂和用什么方法）