补骨脂对A375人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响论文.docVIP

　　补骨脂对A375人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响论文 .freel containing Psoralea on proliferation and melanogenesis in A375 human melanoma cells by serum pharmacological method. Method A375 human melanoma cells edium during logarithmic groined by MTT and NaOH method. Results There test group on proliferation, and there drug-contained serum on melanogenesis (P＜0.01). Conclusion Serum containing Psoralea has strong effect of promoting A375 human melanoma cells proliferation and melanogenesis in vitro. Key ；melanogenesis；cell proliferation 补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的果实,性味辛、苦、温,.freelresco),CO2培养箱(SANYAO),酶标仪(BIO-RAD)等。 1.3 动物 SD大鼠24只,雄性,体重(200±20)g,新疆自治区疾病控制中心实验动物中心提供,许可证号：SYXK(新)2003- 0003。 2 实验方法 2.1 分组、给药及含药血清制备4-5 按完全随机化设计方案,将24只大鼠分为4组,每组6只。药物粉末过100目筛制备为CMC-Na混悬剂。具体分组给药操作如下：正常对照组灌胃生理盐水；补骨脂低(0.038 g/d)、中(0.19 g/d)、高(0.38 g/d)剂量组每日分2次灌胃,连续给药3 d,正常饮食饮水。末次给药后2～3 h腹主动脉无菌取血,分离血清,0.22 μm微孔滤膜除菌,-20 ℃保存备用。 2.2 A375细胞的培养 含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养6。 2.3 细胞增殖测定 采用MTT法测定7。每次实验取同一传代细胞,取对数生长期A375细胞,0.25%胰酶消化3 min,0.4%台盼蓝计数。使用含10%胎牛血清的完全DMEM培养基调整细胞浓度为5×104/mL,接种于96孔板,每孔100 μL。5% CO2培养箱中37 ℃培养24 h。弃去培养基,加入3个剂量不同浓度的含药血清培养液100 μL,对照组加入100 μL的10%空白血清培养液继续培养48 h。48 h后,加5 mg/mL MTT 20 μL/孔,37 ℃、5%CO2培养4 h后弃上清,加入DMSO 150 μL,震荡10 min左右。立即于490 nm测定吸光度值。用吸光度值(OD)表示细胞增殖活性。 2.4 黑素生成测定 采用NaOH法测定7-8,并稍加改动。细胞培养方法和分组方法同上。放入5%CO2培养箱中37 ℃继续培养48 h后,弃去培养基,PBS液洗2遍。加入1 mol/L NaOH 100 μL/孔,37 ℃放置24 h；于490 nm测定吸光度值。用吸光度值(OD)表示黑素含量。 3 统计学方法 实验结果以—x±s表示,组间差异的显著性检验采用SPSS10.0软件进行方差分析,用t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。x 【摘要】 目的 探讨含补骨脂大鼠血清对A375细胞增殖及合成黑素功能的影响。方法 体外培养A375人黑素瘤细胞,于对数生长期添加不同浓度含补骨脂大鼠血清,分别采用MTT法和NaOH法检测细胞增殖及合成黑素的情况。 结果 补骨脂高、中、低剂量含药血清组较空白血清组有明显促增殖作用,在20%的添加浓度时,高、中、低3个剂量含药血清组随着剂量的增加,黑素含量也明显升高(P＜0.01)。结论 补骨脂含药血清有促进A375黑素瘤细胞增殖作用,并使A375人黑素瘤细胞合成黑素增加。 【关键词】 补骨脂；含药血清；黑素合成；细胞增殖 Effect of Psoralea on Proliferation and Melanogenesis in A375 Human Melanoma Cell TANG Xiao-qin1, YAN Ming2, GAO Li2, et al (Pharmacy College of Shihezi University, Shihezi 832000, China；Xinjiang Institute of Traditional Uighur Medi