第五章 培养基和灭菌
(一)射线灭菌 1、方法: 通常用紫外线、高能量的电磁波或粒子辐射灭菌。其中以紫外线最常用。 2、原理:紫外线的作用光谱与细菌体内核酸的吸收光谱相一致,DNA链上核苷酸的碱基因此具有强烈的吸收紫外线的能力,引起DNA结构形式的变化而导致死亡。 3、特点:紫外线对芽孢和营养细胞都能起作用,但其穿透力极低,只能用于表面灭菌。对真菌孢子的杀灭能力不大。主要用来进行一定空间内空气的灭菌(如无菌室等)。 (二)干热灭菌 1、方法:包括火焰灭菌和热空气灭菌,常用的干热空气灭菌是利用电热或者红外线在一定设备内对各种用具物品进行杀菌。生产上常用的干热灭菌的条件是160℃,时间1-2h。 2、原理:高温时微生物各种与温度有关的氧化过程速率增快。 3、特点:时间长、耗热量大,应用不广。一般用于灭菌后要求保持干燥状态的物料。 (三)湿热灭菌 1、方法: 直接用加压湿蒸汽进行物料或设备容器的灭菌。用蒸汽将物料升温到115-140℃保持一定时间,可杀死各种微生物。常用的灭菌条件是120℃,20-30min。 2、原理:在高温及有水分存在的条件下,微生物细胞中的蛋白质极易凝固而引起微生物的死亡。 3、特点:经济,快速,适用于大量培养基及发酵设备的灭菌。 (四)介质过滤除菌 对培养液中某此不耐热的成分可采用过滤除菌法。 发酵过程中所用的大量无菌空气也是用过滤除菌法。 二、化学灭菌
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