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移液器使用与校正
移液器使用与校正
移液器使用 【操作步骤】
1.设定容量值:转动加样器的调节旋钮,反时针方向转动旋钮,可提高设定移液量。顺时针方
向转动旋钮,可降低设定移液量。在调整设定移液量的旋钮时,不要用力过猛,并应注意使移液器
显示的数值不超过其可调范围。
2.预洗:当装上一个新吸头时应预洗吸头,先吸入一次液体并将之排回原容器中。
3.吸液:
[1] 选择合适的吸头安放在移液套筒上,稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空气间隙。
[2] 取液之前,所取液体应在室温(15℃-25℃)平衡。
[3] 把按钮压至第一停点,垂直握持加样器,使吸头浸入液面下2~3 毫米处,然后缓慢平稳地松开
按钮,吸入液体,等一秒钟,然后将吸头提离液面,贴壁停留2-3 秒,使管尖外侧的液滴滑落。
4.放液:
[1] 将吸头口贴到容器内壁底部并保持100~40°倾斜。
[2] 平稳地把按钮压到第一停点,等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体。
[3] 压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。
[4] 松开按钮。
[5] 按吸头弹射器除去吸头。
5.加样器吸嘴为一次性使用。
移液器详细使用步骤
在进行分析测试方面的研究时,一般采用移液枪(pipette)量取少量或微量的液体。对
于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作,是很多人都会忽略的。现在分几个方面详细叙述。
1、量程的调节
正确的容量设定分为两个步骤,一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预
想值;二是细调,当容量值接近自己的预想值以后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过
调节轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响。
在容量设定时,还有一个需要特别注意的地方。当我们从大值调整到小值时,刚好就行;但从
小值调整到大值时,就需要调超三分之一圈后再返回,这是因为计数器里面有一定的空隙,需要弥
补。
在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
2、枪头(吸液嘴)的装配
在将枪头(pipette tips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这时错误的
做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会
导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即
可使其紧密结合。如果是多道(如8 道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪
头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O 型环,并可以看到
连接部分形成清晰的密封圈。
3、移液的方法
1).预洗吸头:
在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,这
样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高
的重现性。其次,在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产
生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。
2)吸液:
先将移液器排放按钮按至第一停点,再将吸头垂直浸入液面,浸入的深度为:P2、P10 小于或
等于1毫米,P20、P100、P200 小于或等于2 毫米,P1000 小于或等于3 毫米,P5ML、P10ML 小于或
等于4 毫米(浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的浸入深度还应
根据盛放液体的容器大小灵活掌握),平稳松开按钮,切记不能过快。
移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,移液器保持竖直状态,
这时可以采取两种移液方法。
一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按
至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。
二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,
其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二
停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮
位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。
3)放液:
放液时,吸头紧贴容器壁,先将排放按钮按
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