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水母毒素的研究进展.pdf

Chin J Mar Drugs,2007 December,Vo1.26 No.6 中国海洋药物杂志2007年 12月第26卷第 6期 · 综述· 水母毒素的研究进展△ 肖良 ,张黎明 (第二军医大学海医系防化医学教研室。上海。200433) 摘 要:概述水母毒素的心血管毒性、神经毒性、皮肤与肌肉毒性、细胞毒性、抗氧化活性及多种酶活性等。 该毒素成分复杂、不耐热、易氧化,在分离、纯化及生物学活性研究等方面受到限制,因此制备高纯度、高活性 水母毒素的新方法有待于探索开发。 关键词:水母毒素;生物学活性 中图分类号:Q959.13,R99文献标识码:A 文章编号:1002—3461(2007)06—0040—04 水母是一类低等的浮游动物,包括刺胞 其它有毒生物的毒素研究。 动物门(腔肠动物门)钵水母纲的全部和水螅 收集含有大量刺丝囊的水母触手,通过 虫纲的部分种类。水母的种类很多,全世界 匀浆、过滤和离心可以分离出完好的纯刺丝 已知约有250种,直径 1O~100 crrl,广泛分 囊,用于下一步的粗毒提取。值得注意的是 布于温带、亚热带及热带海域,属海洋杂食性 除主要分布于触手和口周的刺丝囊外,其他 生物。水母的基本结构由伞部、口腕、触手、 部位(如中胶层、无刺丝囊的触手提取物等) 附器等组成,生活史为水螅世代(无性世代) 也含有一定量的毒性成分,并可产生相关的 和水母世代(有性世代)的交替。有性世代的 生物学效应。因此,必须将刺丝囊与其他组 水母通过触手上的刺丝囊发射刺丝注入毒液 织有效分离开来,得到的刺丝囊纯度越高,保 来捕食轮虫、枝角类、桡足类、小鱼和蝌蚪等。 存越完整,越有利于粗毒及纯毒的制备和活 肽类毒素是刺丝囊毒液的主要活性成分,相 性的保持,以及后续毒理和药理等方面的进 对分子质量1O~600 kDaL1],毒性大,是目前 一 步研究。 所知最毒的毒素之一。我国食用水母已有一 将刺丝囊在粗毒提取缓冲液(NEB)中 千余年,是世界上最早利用水母的国家,水母 重新配制成悬液,经超速离心、超声处理,再 在我国乃至整个东南亚地区具有重要的经济 离心得到的上清液即粗毒。为了使毒素蛋白 和药用价值。但是部分水母含有剧毒,蜇伤 保持稳定性和活性,常在提取缓冲液中加入 后可出现皮肤划痕、红肿,腹痛,痉挛,麻痹, 抗氧化剂(维生素C、安息香酸),巯基保护剂 心脏及呼吸衰竭甚至死亡等严重症状,每年 (DTT,甘油,蔗糖),螯合剂(EDTA,EGTA) 因水母蜇伤致死者屡屡出现,研究水母毒素 以及酶抑制剂(PMSF,DFP)等[ 。 中毒机理与防护措施具有重要意义。 检测粗毒活性之后,即可根据不同的目 的进一步分离。常用方法是采用色谱技术结 1 分离与纯化 合sDs—PAGE等实验,分离到一条或数条 水母毒素主要由一组多肽类物质组成, 电泳带确定单一蛋白组分,然后进行毒素蛋 不耐热、易氧化,因此其分离、纯化都需在低 白的活性或序列研究。John等[4]利用阴离 温、还原条件下进行。此外,水母毒素极易黏 子交换色谱法成功分离到42 kDa的溶血毒 附于各种玻璃器皿上[2],导致毒素分离、纯化 素CAH1,并测定其N末段序列为xAADA— 难度加大,制备高纯度、高活性的水母毒素成 XSTDIDD/GIIG。 Sanchez—R

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