第六章 脂类的测定.pptVIP

3、仪器 ①具塞三角瓶 ?②电热恒温水浴：50~100℃ ?③提取装置 ④布氏漏斗 ⑤具塞离心管 ⑥离心机：3000r/min。 4、试剂 ①氯仿：97%（体积分数）以上 ?②甲醇：96%（体积分数）以上 ???③?氯仿甲醇混合液：按2：1体积比混合 ?④ 石油醚 ⑤?无水硫酸钠：以120~135℃干燥1~2h 5、? 操作步骤 　①提取 准确称取均匀样品5g于具塞三角瓶内（高水分食品可加适量硅藻土使其分散），加入60mL氯仿-甲醇混合液（对于干燥食品，可加入2~3mL水）。连接提取装置，于650C水浴中，由轻微沸腾开始，加热1h进行提取。 　②回收溶剂 提取结束后，取下烧瓶用布氏漏斗过滤，并用氯仿-甲醇混合液洗涤滤器，烧瓶及滤器中试样残渣，滤液、洗涤液一并收集于具塞三角瓶内，置65~700C水浴中回收溶剂，至烧瓶内物料呈浓稠态，而不能使其干，然后冷却。 ③石油醚萃取、定量 用移液管加入25ml石油醚，然后加入15g无水硫酸钠，立即加塞混摇1 min ，将醚层移入具塞离心沉淀管进行离心分离（3000r/min）5min.用10mL移液管加入迅速吸取离心管中澄清的石油醚10mL,于已称量至恒量的干燥称量瓶内，蒸发去除石油醚，于100-105℃烘箱中烘至恒量（约30 min ）。 6、结果计算 式中 -------脂类质量分数，%; m-------试样质量，g; m2------称量瓶与脂类质量，g; m1------称量瓶质量，g; 2.5------从25mL石油醚中取10mL进行干燥，故乘以系数2.5。 1、原理 将试样与盐酸溶液一同加热进行水解，使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来，再用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶剂，干燥后称量，提取物的重量即为脂肪含量。 三、酸分解法 2、适用范围与特点 此法适用于各类、各种状态的食品中脂肪测定。 特别是加工后的混合食品，易吸湿，不好烘干的，用 索氏提取法不行的样品，效果更好。 本法不适于测定含磷脂高的食品、如：鱼、贝、蛋 品等。因为在盐酸加热时，磷脂几乎完全分解为脂肪 酸和碱，当只测定前者时，使测定值偏低。本法也不 适于测定含糖高的食品，因糖类遇强酸易炭化而影响 测定。 (1)? 仪器 ①?恒温水浴50-800C。 ②?100ml具塞量筒。 (2)? 试剂 ①?乙醇（95%体积分数） ② 乙醚（不含过氧化物） ③?石油醚（30~600C沸腾） ④?盐酸 (3) 测定步骤 称重 样品处理 水解 提取 烘干 → → → → 回收溶剂 准确称取固体样品2g于50ml大试管中，加入8mL水，用玻璃棒充分混合，加10ml盐酸。或称取液体样品10g于50mL大试管中，加10mL盐酸。混匀后于70~800C的水浴中，每隔5~10min用玻璃棒搅拌一次至脂肪游离为止，约须40~50min，取出静置，冷却。 ①? 水解 ②? 提取 取出试管加入10mL乙醇，混合。冷却后将混合物移入100mL具塞筒中，用25mL乙醚分次冲洗试管，洗液一并倒入具塞量筒内。加塞振摇1min,将塞子慢慢转动放出气体，再塞好，静置15min，小心开塞，用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10～20min,待上部液体清晰，吸出上层清夜于已恒量的锥形瓶内，再加入5ml乙醚于具塞量筒内振摇，静置后仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶于水浴上蒸干，置95～1050C烘箱中干燥2h，取出放干燥器中冷却30min后称量。 式中 -----脂类质量分数，%； m------试样质量，g; m1------空锥形瓶质量，g; m2-------锥形瓶与样品脂类质量，g; (4)? 结果计算 (5) 说明 ①开始加入8mL水是为防止后面加盐酸时干试样固 化，水解后加入乙醇可使蛋白质沉淀，降低表面张力，促 进脂肪球聚合，同时溶解一些碳水化合物如糖，有机酸 等。后面用乙醚提取脂肪时因乙醇可溶于乙醚故需加入石 油醚降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物残留在水 层，使分层清晰。 ②挥干溶剂后残留物中若有黑色焦油状杂质，是分解物 与水一同混入所致，会使测定值增大造成误差，可用等量 的乙醚及石油醚溶解后，过滤，再次进行挥干溶剂的操作 ③若无分解液等杂质混入，通常干燥2h即可恒量。 四、 罗紫?哥特里法 1、原理 利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂