细胞凋亡与检测原理.pptVIP

细胞凋亡与检测方法 细胞坏死 （细胞被动性死亡） 细胞受到急性强力伤害时，立即出现的早期反应。是病理条件下细胞死亡的过程。 细胞肿胀，线粒体和内质网肿胀。 核染色质随机降解呈絮状, 蛋白合成减少。 细胞膜、溶酶体破裂, 细胞内容物流出,引起周围炎症 细胞凋亡 （细胞主动性死亡） 多细胞有机体为调控机体发育、维持内环境稳定，由基 因控制的细胞主动性死亡过程。又称程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD). 从严格的词学意义上来说，PCD与凋亡是有很大区别的 二、细胞凋亡的检测方法 (二) 形态学方法 借助普通光学显微镜，荧光显微镜或透射电镜对培养细胞，细胞涂片或者组织切片进行形态学观察。细胞凋亡的形态特征分为3部分： 凋亡的起始 凋亡小体的形成 凋亡小体被邻近细胞或吞噬细胞吞噬清除 下面以碧云天生物技术公司生产的细胞凋亡-hoechst染色试剂盒为例 （三）电泳法 在细胞凋亡时，内源性mg2+、ca2+依赖性核算内切酶被激活，对DNA的切割有3种形式。即核小体间DNA链的断裂、大分子DNA链的断裂以及DNA单链的断裂。用胰酶消化体外培养细胞，经PBS洗涤，用蛋白K消化，酚-氯仿抽提凋亡细胞的基因组DNA，取5ug琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察可见特征的‘梯状’（ladder）DNA条带。 该方法