1衍生方法.DOC

化学化工分析方法选择-研发分析方法开发进阶 第一章 衍生的方法与应用 我们在日常的样品分析中经常会遇到一些有机合成反应中控时样品不易气化、热分解、易聚合、又或者是见水分解等等而此时由于条件的有限而又不能做化学分析来进行中控，这时我们总是想到一个熟悉而又陌生的方法---衍生。熟悉是因为我们常常听说这个办法，而陌生是因为我们真的很难找到比较系统、全面的衍生方面的资料或者是方法介绍。 我们常说的衍生，其实我给的定义就是我们人为的加了一步反应，使我们不能直接分析的样品转化为我们能够应用已有的条件来分析。虽然是只加了一步反应，能够分析了，但由此引入的问题也很多，下面逐一的介绍一下。 衍生法种类　衍生法种类繁多，用于色谱试样处理的衍生法主要有：硅烷化法、成肟或腙法、酯化法、酰化法、卤化法、环化法及无机试样衍生法。分析工作者可根据待测试样中所含官能团的种类选择适宜的衍生方法。一般地，硅烷化衍生方法适于羟基化合物，也可用于含羧基、巯基、胺基等官能团的化合物。酯化衍生法主要用于含羧基的化合物试样，所得到的衍生物一般为甲酯、乙酯、丙酯或丁酯，其中最常见的是甲酯化合物。酰化衍生法主要用于胺基的酰化衍生物制备，也可用于含羟基、巯基等化合物的衍生处理。卤化衍生法可由不同的卤化方法分析含不饱和键化合物、羟基、羧基、羰基化合物。羟基化合物在适当条件下可与醚化试剂作用衍生成醚。羰基化合物可适用于成肟或成腙的衍生试剂处理后作色谱分析。环化法可用于分析含两个或两个以上官能团的有机物。水、无机气体、无机酸、金属元素等也可通过衍生试剂作衍生处理后作色谱分析。气相色谱中化学衍生的作用主要是：1改善样品挥发性，2改善样品的峰形，3改善样品的分离，4提高化合物的检测灵敏度。–NH等化合物，因为它们趋向于形成分子间氢键，从而影响基团的化合物原有的相互作用及稳定性。HPLC中常用的衍生方法为了增强紫外吸收，荧光及电化学检测器检测性能。 最常用的衍生方法有： 硅烷化。硅烷基衍生物广泛用于气相，是用三甲基硅烷取代酸、醇、硫醇、胺、酰按、烯醇酮醛等，分子中活泼H而形成。三氟官能团常用于提高电子捕获检测的灵敏度。衍生方法使氨基酸的定量和定性分析容易。 烷基化。是活泼H被脂肪族戓芳基（如苄基）所取代。这可用硅烷化衍生试剂硅烷化试剂TMCS硅烷化试剂BSTFA BSTFA+TMCS, 硅烷化试剂DMDCS 二甲基二氯硅烷硅烷化作用是指将硅烷基引入到分子中，一般是取代活性氢（如：羟基hydroxyl, 羧基 carboxylic acid, 胺amine, 硫醇thiol, 磷酸盐phosphate）。活性氢被硅烷基取代后降低了化合物的极性，减少了氢键束缚。因此所形成的硅烷化衍生物更容易挥发。同时，由于含活性氢的反应位点数目减少，化合物的稳定性也得以加强。((CH3)3SIOR+胺.HCL 单独使用HMDS时，应痕量酸作为接触剂。 2R-OH+(CH3)3SINHSI(CH3)3-------(2(CH3)3SIOR+NH3 当两者同时使用时：3R-OH+(CH3)3SICL+(CH3)3SINHSI(CH3)3-------(3(CH3)3SIOR+NH4CL 实际应用中，常二者合用作为TMS试剂。 BSA，或TSIM, 优点在于操作比较简便，只要将样品直接溶于其中即可。在生物样品分析中，常将提取物吡啶中，再加BSA。 BSTFA, 与BSA类似。 （二）甲酯化试剂 甲酯化试剂主要用于具有羧基的化合物，二者作用后生成相应的甲酯，进行GC分析。常用的甲酯化试剂为甲醇制HCL(或H2SO4)液或重氮甲烷乙醚液。1、与甲醇制HCL液回流2小时。 HCL RCOOH+CH3OH-------(RCOOHCH3+H2O 2、在0℃下与重氮甲烷的乙醚溶液反应 RCOOH+H2C==N+==N--------(RCOOCH3+N2 以重氮甲烷为试剂的优点是反应快速，但试剂制备比较困难，有爆炸性。 （三）卤素试剂 用于衍生物制备的卤素试剂大都是含氟化合物。由于氟的亲电性强，对ECD显示很高灵敏度，可检测pg数量级的样品。常用 的试剂有三氟乙酐（TFAA）、五氟丙酐（PFPA）、五氟丁酐(PFBA)、七氟丁酐（HFBA）,以及甲基双三氟乙酰胺（MBTFA）。 这些试剂主要用于含氨基、羟基化合物的衍生物制备。现以TFAA为例列出反应式如下： R-NH2+(CF3CO)2O-(R-NHCOCF3+CF3COOH R-OH+(CF3CO)2O-(R-OCOCF3+CF3COOH 操作时，先将样品四氢呋喃中，然后加TFAA试剂及吡啶。放置几分钟即可进样。MBTFA的优点是可用试剂直接溶解样品，TFA化极易，而且不生成反应副产物-酸。 2R-NH2+(