微生物学实验报告 实验室环境和人体表面微生物检查1 郭森.doc

实验室环境和人体表面的微生物检查 作者：郭森 地址：山东大学生命科学学院微生物楼341微生物实验室 摘要：这次我们在实验室里进行了培养基的制作和一些简单的微生物接种，目的是熟悉微生物实验的操作并了解无菌操作的重要性。首先我们组一共制作了十二个肉膏蛋白胨琼脂平板培养基，对微生物实验的基本操作有了一定的接触和掌握；之后，分别对制作的平板培养基作了保留空白、放置空气和用棉棒沾取环境获取微生物等处理；经过大约两天左右的恒温培养，可以观察到除了空白对照以外，其他十一个培养基都生长着各式各样的菌落。该现象表明，在空气、地面等环境和人体表面环境中存在着大量的微生物。所以，无菌操作是微生物实验中极其重要的一个环节。 关键词：实验室环境；人体表面：肉膏蛋白胨琼脂平板；微生物接种；恒温培养 前言：这次实验要确定我们周围环境和人身体表面的确存在着大量的微生物，并对其进行初步的观察，同时熟悉一下微生物实验的操作。众所周知，微生物无处不在，从看似很脏的地面到透明无色的空气再到我们的身体上都分布着数不清的各种各样的微生物，因此我们从环境获取微生物，希望从这些环境中微生物的数量和形态观察出实验室环境中微生物的大体情况，体会无菌操作的重要性。这次实验我们是采取将看不见的微生物“放大”成子细胞群体即菌落的方法确认和观察微生物的，即使用牛肉膏蛋白胨平板培养基，其中四个分别暴露在空气中保持不同的时间，其他是使用消毒后的棉棒分别在地面、实验台、手指、空腔内壁、无菌水、自来水和纸币上沾取后，在酒精灯旁按压到培养基平板上，之后将所有培养基放到恒温培养箱中恒温培养大约两天的时间。本实验报告先介绍了本次实验的实验材料与方法，然后是对实验的结果与分析进行描述，最后是总结性的小结部分。 材料与方法 1、1 材料 1、1、1 培养基 肉膏蛋白胨琼脂平板。 1、1、2 溶液和试剂 无菌水。 1、1、3 仪器和其他用品 灭菌棉签（装在试管内），试管架，煤气灯或酒精灯，记号笔和废物缸等。 1、2 步骤和方法 1、2、1 培养基的制作 1、2、1、1 称量 制作十二个肉高蛋白琼脂平板，约需要称量水200ml，蛋白胨2g，氯化钠1g，牛肉膏0.6g，琼脂3~4g。 1、2、1、2 熔化 按上述顺序将材料分别放到一大烧杯中混合加热至其熔化。 1、2、1、3 调节PH值 待琼脂熔化后，调节溶液PH至7.0~7.2。 1、2、1、4 转移灭菌 将溶液从烧杯中转移至锥形瓶中，塞上棉塞加牛皮纸包裹后同洗净的培养基和放有棉塞的试管一同放入高压灭菌锅里，灭菌20min左右。 1、2、1、5 接种 最后，将锥形瓶中溶液在酒精灯火焰旁转移至灭菌后的培养皿中，等待其冷却固定后便可接种。 1、2、2 微生物的获取和接种 1、2、2、1 编号并保留空白 将做好的十二个培养基分别编号1~12，保留其中第一个作为空白对照。 1、2、2、2 分梯度制作空气培养基 按时间顺序每隔五分钟打开9、10、11、12号培养基，分别是18：10，打开9号培养基，18：16，打开10号培养基，18：21，打开11号培养基到18:29合上培养皿，12号培养基大约18：26打开，9、10、12号培养基一直到实验结束（约18：35）才合上。 1、2、2、3 接种环境中微生物 将第9号培养基打开后使用灭菌处理后的棉棒沾一下地面，再在火焰旁在2号培养基上按一下，之后分别使用同样的方法，用无菌棉棒获取了实验台、纸币、口腔、自来水和手指上的微生物，培养基编号分别为3、4、5、7、8五个，6号培养基直接将一根头发放到培养基上；在以上过程中，分别按顺序打开10、11、12三个培养基，使其均暴露于空气中，时间从短到长分别是12、11、10、9号培养基。 1、2、3 微生物恒温培养 将十二个培养基均放入恒温培养箱中在37°C条件下恒温培养两天左右，即可进行观察。 结果与分析 2、1 实验结果 见表1，见图1~12 表1 实验室和环境和人体表面微生物恒温培养结果统计表 培养基 1 空白 2 地面 3 实验台 4 纸币 5 口腔 6 头发 菌落数量 看不清单独数量但是成一连续带状，边缘不规则 菌落连成一大片，有大约3个单独的菌落 散落的大约有30~40个，其他的聚在一起成条状大概有100个 严格意义上讲只有1个 成放射状聚集，已经分不清了 菌落形态 （见图1） 菌落较简单，呈乳白色，部分透明，部分呈黄色；有明显边缘；表面粗糙 （见图2） 半透明状，菌 苔痕迹较薄，不规则；边缘厚；表面光滑（见图3） 呈白色小点状，有突起，分散（见图4） 整体为规则的圆形，分环，由内而外依次为白色 透明 白色（见图5） 菌落沿发丝分布，发根处和中间居多，呈白色放射状（见图6） 简要说明 因为是对照所以无明显