微生物实验室培养基的管理.ppt

微生物实验室培养基的管理、使用及质量控制;主要内容;1.培养基的订购和接收;订购;接收;每种培养基储藏柜建立说明并记录以下信息：培养基名称，批号，规格数量，有效期，到货日期，验收日期，存放地点，储存条件 根据“先入先出”原则，按到期日早晚排列，保证培养基保持新鲜及更新 开封超过一年的培养基视为过期培养基要处理掉;培养基入库登记表;2.培养基的制备; 培养基配置记录;制备前的准备工作 ;用带磁力搅拌的加热板、沸水浴或流动蒸汽来加热以防烧焦或沸出，加热时要保证磁力棒在搅动 器皿和容器 使用硅酸硼玻璃、不锈钢、铝或别的耐腐蚀材料，其容积至少要比所准备的培养基的体积大10% ;配制时先用半量的水将之充分振荡混匀,再加入剩余的水并洗掉粘在壁上的残余 所有培养基都是热敏感的,不要加热超时 培养基不含明胶或琼脂的应用冷水或仅需微热来溶解 培养基含明胶或琼脂的必须加热至完全溶解,用沸水浴或流动蒸汽来加热 灭菌之前要检查是否完全溶解,是否有琼脂颗粒粘壁 ;灭菌;一个灭菌周期完成后，小心打开灭菌锅门使培养基冷却5-10分钟再拿出 已灭菌培养基在盖子拧紧后放入恒温水浴锅中（一般为50—55℃） 灭菌后培养基pH的调整：使培养基冷却至25℃，取单位体积的培养基，用pH计测试并用1mol/l的HCl或1mol/l的NaOH调至培养基要求的pH范围，再根据添加的酸或碱的量来计算校正全部同种培养基的pH 培养基不能重复灭菌;灭菌记录;培养基使用登记表;倒平板和分装;分装用的瓶子或试管的体积应该是所分装培养基的1.5倍以上 含热敏感成分添加剂的培养基，其热敏感成分用0.45μ的滤膜来过滤除菌，并在培养基冷却到50℃后才能加入 已凝的琼脂培养基不能放在加热板上直接加热，微波炉或水浴可用来再熔化已凝的琼脂培养基，注意加热前要拧松盖子 培养基不能重复熔化，这会破坏其成分并增加污染机会 ;已灭菌的、熔化的培养基要放在50℃恒温水浴中冷却并在6小时内分装 平板凝固后倒置平板进行培养和贮存，TBG等分装后要放冰箱 象BS等有沉淀的培养基倒平板时注意振荡使之浊度均一 平板上的气泡可用本生灯焰轻轻加热除去 平板上的水可造成微生物蔓延和菌落液化,可在30-40℃恒温箱中除去 pH6.0以下的酸性培养基配制时要在温和条件下，因为加热可造成琼脂和明胶分解;若已造成分解可按5.0克/升琼脂来补充 平板架每次使用后用纯水冲洗，紫外灯照射杀菌;3. 培养基的测试;无菌实验;肉汤要37℃培养24小时观察无菌后才能使用 倒平板后要培养24小时观察无菌后才能使用：细菌板放37℃培养箱，真菌板放28℃培养箱 装在试管中的培养基培养24小时后若发现有长菌，则该批培养基要灭菌后扔掉;在倒平板的同时倒一定数目的平板作为空白对照，并在该批平板将被使用的温度和时间下培养，直到该批平板用完，记录其阳性率 若使用培养基来做倾注平板实验，要同时用所有培养基倒一个空白板作培养 ;阴阳性对照;生长能力测试 ;生长能力测试——测试方法 ; 只有培养基其pH在正确的范围内,通过了无菌实验及生长测试,各种对照合格,才能使用;若其中任意一项不成立,就没有达到实验室能使用的标准而不能使用;若实验室的实验与测试培养基的实验同时进行,而培养基未达标,那么所有的微生物实验将用合格的培养基重新进行 若培养基实验失败，要检查灭菌记录和无菌操作记录，找出失败原因;4.培养基的储存;成品培养基 ;脱水培养基 ;实验室制备的培养基 ;实验室制备的培养基及试剂（续）;注意事项 ;;谢谢观赏