银鲳不同组织中4种同工酶的表达差异.pdfVIP

第39卷第1期 海 洋 渔业 V01．39，No．1 2017矩01B MalineFisheries Jan．，2017 文章编号：1004～2490(2017)01—0068—08 银鲳不同组织中4种同工酶的表达差异 刘磊1’2，张晨捷1，彭士明1，高权新1，施兆鸿1’2 (1．中国水产科学研究院东海水产研究所，农业部东海与远洋渔业资源开发利用 重点实验室，上海200090；2．上海海洋大学水产与生命学院，上海201306) 摘要：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，分析了银鲳(Pampusargeateus)脾脏、肝脏、肌肉、心脏、肾脏等5种 并对各种同工酶的酶谱进行了分析。结果表明：这4种同工酶在银鲳5种组织中的分布均存在一定的组织特 异性，其与各组织的生理机能密切相关。银鲳4种同工酶共记录出61条酶带，其中EST被检测出的酶带数量 最多也较复杂，ADH同工酶酶带数量最少，只有6条酶带被检测到，LDH和GDH分别检测到16条和9条酶 带；组织特异性主要表现在位点表达和酶活性强弱不同这两个方面，GDHl和ADH2只在肝脏中表达。 关键词：银鲳；同工酶；组织特异性 中图分类号：S965．3 文献标识码：A 同工酶(isozyme)是指由一个或多个基因座 位编码、存在于同一种(或属)的生物或同一个体 特异性的初步分析，以期为其种质资源、人工选 的不同组织中，甚至存在同一组织或同一细胞 育和遗传研究提供同工酶谱和生化遗传学的参 中，催化同一种化学反应，但酶分子结构有所不 考指标。 同的一类酶。同工酶在生物发育分化及代谢调 1材料与方法 节中必不可少，鱼类同工酶的研究始于1960年， 至今技术已经十分成熟，研究方法较多。作为一 1．1实验材料 种生化遗传指标，已经广泛用于鱼类物种鉴 实验鱼取自江苏省启东的上海市水产研究 定¨-2]、亲缘关系分析‘3叫]、种群遗传‘5“]、系统所启东科研基地，为东海水产研究所本所自行繁 发育H1等各个方面。 育的1龄银鲳，从养殖池中随机捞取10ind，平均 argenteus)属鲈形目鲳亚目鲳 银鲳(Pampus 体质量为(18．8±7．2)g，平均又长为(9．1± 科鲳属，为暖温性近海中上层集群性经济鱼 1．1)am。采样时间为2015年8月。 类捧J，银鲳主要分布于印度洋、印度．太平洋区、朝 1．2酶液样品制备 鲜和日本西部海域，在中国沿海地区也有分 解剖银鲳，迅速摘取脾脏、肝脏、肌肉、心脏、 布L9J，是东海主要捕捞经济鱼类之一，属名贵食 。肾脏5种组织，冲去血污，于滤纸上静置吸去水 用鱼类。迄今对银鲳的研究，主要集中在种群洄 分，装入管中冷冻备用。实验时，切取一小块样 游和资源量评估∽一0l、资源动态[8。¨、生殖力及 品，加入预冷的磷酸缓冲液(0．1 7．0)，加 M，pH 人工繁养殖‘12。4|、生理及生态n5-17]等方面。而 入比例按照1：4(质量／体积)，匀浆机中匀浆后 对银鲳同工酶的研究还较少，本研究对银鲳4种 min，然后12 4℃静置3 000转离心10min，取上 同工酶[酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷氨酸清液备用。取等体积的上清液与上样缓冲液 收稿日期：2016—01—09 基金项目：国家科技支撑项目(2011BA