保加利亚乳酸杆菌分解多种尿毒素的定向诱变.PDF

中国血液净化2014年3月第13卷第3期 Chin J Blood Purif,2014,Vol.3March,,No.13 • 169 • ·基础研究· 保加利亚乳酸杆菌分解多种尿毒素的定向诱变 白运焕 蒋亚芬 蒋云生 【摘要】目的 选育一株能分解多种尿毒素的益生菌为慢性肾衰的肠道细菌疗法提供新菌种。 方 法 原始保加利亚乳酸杆菌先经尿毒症患者血清诱导培养，后用物理(紫外线)和化学(硫酸二乙酯)双 重多次诱变方法对其进行诱变，以肌酐分解率为观察指标，筛选出具有高效分解肌酐的乳酸菌，测定其遗 传稳定性并观察其对尿素氮、尿酸、血磷、甲状旁腺素、同型半胱氨酸的分解能力。 结果 从大量突变株 中选育出一株高效分解尿毒素的菌株DUC-17,其肌酐、尿素氮、尿酸、血磷、甲状旁腺素、同型半胱氨酸的 3 分解率为17.23%，36.02%，9.84%，15.73%，78.26%，12.69%。经5次传代其分解力仍稳定。原始菌株不具 有分解上述毒素的能力。 结论 运用尿毒症患者血清定向诱导后经硫酸二乙酯-紫外线复合诱变的方 法，成功获得一株高效分解多种尿毒素的保加利亚乳酸工程菌，其尿毒素分解力能够稳定遗传。 【关键词】保加利亚乳酸杆菌；肌酐；慢性肾衰竭；尿毒症毒素 中图分类号：R692.6 文献标识码：A doi:10.3969/j.issn.1671-4091.2014.03.011 DirectedDirected mutagenesismutagenesis ofof lactobacilluslactobacillus bulgaricusbulgaricus forfor decompositiondecomposition ofof uremicuremic toxinstoxins BAI Yun -hua1,2, JIANG 2 2 1 l, 2 Ya-fen , JIANG Yun -sheng Xuzhou Central Hosp ita Xuzhou 22 1009; Dep artment of Nephrology, Xiang - l, y a Second Hosp ita Central South University, Changsha 4 100 11, China Corresp onding author: JIANG Yun -sheng, e-mail:j iangy s2005@ 【AbstractAbstract】ObjectiveObjective We aimed to obtain a strain of probiotics from lactobacillus bulgaricus capable to decompose uremic toxins, to provide a new strain of intestinal bacterium for the treatment of chronic renal failure. MethodMethod The original lactobacillus bulgaricus was induced by incubation in uremic patients ’sera, and then repeatedly induced by physical (ultraviolet radiation) and chemical (diethyl sulfate) methods. We used the decomposition ability to creatinine as the index, to select the strains capable to efficiently decompose creatinine, and then to test their genetic stability and th