畜禽养殖技术模块实训指导 项目二　分光光度计使用.doc

项目二　分光光度计使用 ? 一、技能目标 本项目是畜牧兽医、畜牧、兽医、动物营养与饲料、兽医卫生检验等专业学生必需掌握的一项基本技能，要求学生熟练掌握分光光度计的操作方法，为实验室分析与检测打好基础。 二、教学资源准备 （一）材料与工具　 721分光光度计 （二）实训场所　 校内实验室 （三）师资配置　 实训时每班配备1名教师，技能考核时配备2名教师。 三、原理与知识 721型分光光度计是在可见光范围内（360 nm～800nm）进行分光光度分析的常用仪器，可测定某一浓度、不同颜色的溶液吸光度范围。 （一）光度测定的误差? 在分光光度分析中除了各种化学条件所引起的误差以外，测定中仪器使用不当也会带来误差。为了减少误差，要使比色皿透光面玻璃无色透明，成套同种厚度与比色皿的厚度应相等，使用前对比色皿的厚度应作检查。检查的方法是把某一浓度的某有色溶液装入比色皿内，在相同的条件下，测定它们的透光度是否相等，允许成套同种厚度比色皿之间透光度相差不超过0.5%。在测量时，溶液吸光度的大小也会影响测量的准确度，但一般情况下要求准确至1～2位有效数字。 （二）721型分光光度计的结构 ????????????????? ????????? ???? ? ? ? ? ? ? ? 图2? 721型分光光度计的结构 ????? 1. 灵敏度档?? 2. 波长调节器? 3. 电位器? 4. 光量调节器? 5. 比色皿座架拉杆 6. 电源开关?? 7. 比色皿暗箱? 8. 读数（检流计标尺） 四、操作方法及考核标准 （一）操作方法与步骤 1．预热仪器? 将电源开关打开，使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。 2．选定波长? 根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。 3．固定灵敏度档? 为使有色溶液的吸光度读数为0.2～0.7，旋动灵敏度档，选择合适的灵敏度后并固定于某一档，一般测量固定在1档。 4．调节“0”点? 轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）。 5．调节T=100%? 将盛蒸馏水(或空白溶液，或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架 中的第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=100%，即表头指针恰好指在T=100%处。 6．测定? 轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为 该有色溶液的吸光度，读数后，打开比色皿暗箱盖。 7．关机? 实验完毕后切断电源，将比色皿取出洗净并将其座架及暗箱用软纸擦净。 8．注意事项 （1）拿比色皿时手指不要碰比色皿的透光面，以免沾污。 （2）每次实验后立即清洗比色皿。一般先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污，可用盐酸-乙醇混合洗涤液浸泡片刻，再用水冲洗。不能用碱性溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿，也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。 （3）比色皿外壁的水要用擦镜纸或细而软的吸水纸吸干，以保护透光面。 （4）测定有色溶液吸光度时，一定要用有色溶液冲洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都是按从稀到浓的顺序测定，以减小测量误差。 （5）在实际分析工作中，通常根据溶液浓度的不同，选用厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。 （二）技能考核标准 考核内容 及分数 分配 操作环节 与要求 评　分　标　准 考核 方法 熟练 程度 时限 分值 扣　分　依　据 分光光度计使用 （100分） ①预热仪器 10 操作不规范扣2分，未操作扣10分 单人操作考核 熟练掌握 20min ②选定波长 20 选定不正确扣20分 ③调节“0” 15 操作不规范扣5分，未操作扣15分 ④调节T 15 操作不规范扣5分，未操作扣15分 ⑤测定 20 操作中每错误1次扣5分，直至扣20分 ⑥关机 10 操作不规范扣2分，未操作扣10分 ⑦完成时间 10 每超时1min扣2分，直至10分 ? ? 五、复习思考题 721型分光光度计使用时注意事项？ 2