血液的采集与保存.ppt

第一章 血液一般检验 绪 论 一、临床检验（clinical laboratory technology or science） 血液标本采集和血涂片制备 常用血液标本抗凝剂及其使用选择 1、柠檬酸钠（枸橼酸钠） 血涂片的制备技术 将推玻片向1的方向稍抽回，当血液充满推玻片的宽度后，以一定均匀的速度向2的方向滑动。 细胞染色技术 染料---生物学染色剂：将生物组织细胞和病原体染色，在显微镜 下观察结构。 瑞氏染色法 （一）、染色原理 分两相进行，第一相是酸性伊红与细胞中的碱性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒结合；碱性染料天青 B与细胞中的酸性物质如核染色质、特异中性颗粒、 血小板结合。第二相是天青B和伊红结合在适宜条件下 形成紫色的天青B-伊红复合物，结果使白细胞核染色质成紫色（疟原虫的染色质成红色），中性粒细胞的颗粒及血小板颗粒区成紫色。 六、 姬姆萨染色法 （一）、染色原理： 基本成分仍然是伊红和亚甲蓝，改进了染料的质量，使细胞核着色好，结构显示更清晰，而胞浆和中性颗粒染色较差。 七、巴氏染色法 是脱落细胞染色法中较好的染色方法。 显微镜细胞计数法 细胞计数是临床检验最常用的技术。 显微镜计数法、血细胞计数仪计数法 细胞计数注意事项 供计数的标本必须新鲜，各种体液标本做到随采随处理 混匀 加盖玻片的方式 稀释液要过虑，小试管、定量吸管、计数板均须清洁，以免杂质、微粒等误认为细胞 计数误差 1、技术误差（technical errors) 使用器材不符合要求 采血部位不当 稀释倍数不准 充液不当 血液发生凝固 固有误差 在显微镜计数法中包括计数域误差（field error)、吸管误差（pipet error)和计数室误差（chamber error)三种 （二）、试剂 1. Wright染液 瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml 甲醇：有强大的脱水力，可将细胞固定为一定 形态，并使蛋白质沉淀为颗粒状、网状等结构，增 加细胞与染料接触表面积，提高对染料的吸附作用， 增强染色效果。 磷酸盐缓冲液（PBS）：磷酸二氢钾（无水）0.3 g，磷酸氢二钠（无水）0.2g, 蒸馏水加到1000ml。 配好后用磷酸盐溶液校正pH，塞紧瓶口备用。 染色方法： a. 用蜡笔在血膜两头划线，平放于染色架上。 b. 加瑞氏染液覆盖血膜，固定1min。 c. 滴加等量或稍多的缓冲液，混匀，染色5-10 分钟。 d. 用清水冲洗，待干后镜检。 注意事项： a. 血膜要干透后才能染色，否则染色时易脱落 b. 染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关， 一般染液淡、染色时间长些效果好。 c. 染液不能过少，以防蒸发沉淀。 d. 冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲，防染料 沉着。冲洗时间也不能长。 e. 染色过淡，可复染。 f. 染色过深可用水冲洗或浸泡，还可用甲醇脱色 （二）、试剂 Giemsa 甲醇 纯甘油 （三）、染色方法 1. 甲醇固定干燥血膜3-5min 2. 将血膜在染液中浸染10-30min 3. 流水冲洗,待干后镜检 计数板 * * * * 又称实验诊断学，就是通过实验室的各种检查方法，包括感官检查、理学检查、化学检查、显微镜检查以及自动化仪器检查等，对病人的血液、体液、分泌物和排泄物等标本进行检查、分析，以获得病原、病理变化及脏器功能状态等资料。 二、临床检验在医学中的作用 1、为准确诊断、及时治疗提供依据 临床检验的结果是支持诊断、鉴别诊断、甚至确定诊断的 主要依据。 例：anemia 依据：血中红细胞和血红蛋白量减少 leukemia 依据：血象和骨髓象 肾脏有实质性损伤的依据 尿液中出现蛋白、细胞 管型 问：tumor？ 2、为分析病情、观察疗效、判断预后提供依据 在疾病过程中，血液、体液、分泌物和排泄物也 会随之发生相应的变化 3、为预防疾病提供资料 如血象和肿瘤细胞学的普查等 三、临床检验的一般方法 1、目视检查 直接观察标本：颜色、透明度、性状，有无 凝块或寄生虫 2、理学检查 液体的相对密度、血液比粘度、红细胞沉降 率、红细胞比积等病理变化 3、化学检查 定性