一株枯草芽孢杆菌分离鉴定.doc

产生芽孢菌霉素L，大侧柏酸，表面活性素三种物质的枯草芽孢杆菌BBK-1菌株的分离鉴定研究 Niran Roongsawang?Jiraporn Thaniyavarn?Suthep Thaniyavarn?Takayuki Kameyama?Mitsuru Haruki?Tadayuki Imanaka?Masaaki Morikawa?Shigenori Kanaya 摘要 高盐区采集了能够产生大量生物表面活性素的耐盐菌，并分离各种嗜盐菌。本实验分离鉴定了一株耐盐芽孢杆菌BBK-1，发现并证实了BBK-1菌株能产生芽孢菌霉素L，大侧柏酸，和生物表面活性素。为了深入研究耐盐菌产生物表面活性素的机理通过借助分子生物学的方法克隆编码PPTase的sfp同源基因。 材料与方法 从泰国中部采集各种样品，包括耐盐咸土，砂，海水和发酵食品，分离产生物表面活性素的细菌。将这些样品稀释涂布在石油–LBGS琼脂平板上，30℃下过夜培养。油–LBGS琼脂平板配方为(w/v)：1%细菌蛋白胨、酵母膏0.5%、1%葡萄糖、5%氯化钠、1.5%琼脂，NaOH调节pH值为7.5、覆盖表面的原油为30ml。有油晕的菌落说明生产了生物表面活性剂，(Morikawa et al. 1992)。挑取菌落，接种在LBGS液体培养基中，在30℃下200 rpm搅拌有氧培养 24h。 分离上清液，用于生物表面活性素的试验