鸦胆子油乳体外对人结直肠腺癌细胞(HCT15)增殖和凋亡及PTEN、Bcl-2表达影响.pdfVIP

鸦胆子油乳体外对人结直肠腺癌细胞（HCT15 ）增殖和凋亡及PTEN 、Bcl-2 表达的影响 中文摘要 鸦胆子油乳体外对人结直肠腺癌细胞（HCT15 ）增殖和 凋亡及PTEN 、Bcl-2 表达的影响 中文摘要 目的： 鸦胆子油乳是以鸦胆子仁石油醚提取物为原料，以精致大豆磷脂为乳化剂制成的 水包油型乳剂。对多种肿瘤有良好的疗效，其可能的作用机制为：选择性破坏肿瘤的 细胞膜和线粒体；抑制癌细胞生长和DNA 合成，阻断癌细胞的细胞周期；升白细胞 作用；提高机体免疫力；对多种药物的耐药有逆转作用等。本实验以鸦胆子油乳为实 验对象，研究鸦胆子油乳体外抑制人结直肠腺癌细胞（HCT15 ）增殖和凋亡的影响， 探讨PTEN 、Bcl-2 表达的变化。为鸦胆子油乳用于结直肠癌治疗提供实验依据。 方法： 1 培养HCT15 细胞，2.取对数生长期细胞至96 孔细胞培养板中。3.加入三种不 同浓度的鸦胆子油乳48 小时后，用显微镜观察细胞生长情况。4.用CCK8 试剂检测 不同浓度的鸦胆子油乳酶标仪测定在 450nm 处的吸光度。5.提取 HCT15 细胞 RNA 以及加了鸦胆子油乳的HCT15 细胞RNA ，然后进行RT-PCR 实验，检测促凋亡基因 PTEN 以及凋亡抑制基因Bcl-2 表达水平的变化。6.用流式细胞仪以FL3 通道检测， 结果通过Modfit 软件进行分析，观察鸦胆子油乳对人结肠腺癌细胞(HCT15)细胞周期 的影响。 结果： 1.CCK8 法显示三组浓度鸦胆子油乳（10ug/ml，20ug/ml,40ug/ml ） 对人结直肠 腺癌细胞（HCT15 ）作用48 小时后，有明显的抑制作用，存在量效关系。2.取鸦胆 子油乳组细胞及未加药组细胞进行 RT-PCR 实验显示：在鸦胆子油乳作用下，PTEN 基因的表达升高，Bcl-2 基因的表达水平降低，在mRNA 水平证明鸦胆子油乳可促使 I 中文摘要 鸦胆子油乳体外对人结直肠腺癌细胞（HCT15 ）增殖和凋亡及PTEN 、Bcl-2 表达的影响 细胞凋亡发生，抑制了HCT15 细胞的增殖。3.用流式细胞仪检测鸦胆子油乳对HCT15 细胞周期的影响，实验结果表明：加入鸦胆子油乳大量细胞阻滞在S 期，无法顺利完 成细胞周期。 结论： 1.鸦胆子油乳体外抑制人结直肠腺癌细胞增殖，能阻滞细胞DNA 的合成，可诱 导细胞凋亡。2.凋亡过程中检测到在鸦胆子油乳作用下，PTEN 基因的表达升高，Bcl-2 基因的表达降低。 关键词： 细胞周期，细胞凋亡，细胞增殖，鸦胆子油乳，HCT15 细胞，PTEN 基因，Bcl-2 基因，CCK8，RT-PCR 。 作 者：钱一平 指导老师：陈 凯 II 鸦胆子油乳体外对人结直肠腺癌细胞（HCT15 ）增殖和凋亡及PTEN 、Bcl-2 表达的影响 英文摘要 Java brucea fruit oil emulsion affects the functioning of proliferation and apoptosis of colorectal adenomas cancer cells (HCT15) in vitro and the influence of PTEN, Bcl-2 expression Abstract Objective: Java brucea fruit oil emulsion is Oil-in-water emulsion,witn brucea ren petroleum ether