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基因功能缺失技术及探究现状 　　摘要：基因功能缺失是目前研究基因功能最重要、最有效的手段之一。目前应用比较广泛的基因功能缺失技术主要有反义RNA技术、RNA干扰技术、ZFN技术、TALEN技术、CRISPR-Cas系统等。这些技术通过抑制或者沉默特定基因的表达，研究生物体相关表型变化，推测该基因的相关功能。在实际研究中，基因功能缺失往往和基因过量表达一起，为基因的功能研究提供最直接的证据，在生物、医学、农业等领域得到广泛应用。本研究系统介绍了几种常用的基因功能缺失技术的发展历程、技术原理及应用等，并展望未来的研究和应用 关键词：反义RNA；RNA干扰；ZFN；TALEN；CRISPR-Cas系统 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）08-1405-08 DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.08.002 Research Progress on Loss of Gene Function Technologies NING Hui-yua，b，LIU Caia，b，ZOU Hua-wena，b （a.College of Agriculture；b.Hubei Collaborative Innovation Center for Grain Industry，Yangtze University，Jingzhou 434025，Hubei，China） Abstract： Loss of gene function technology is one of the most important and efficient methods to study gene function at present. Now main widely used loss of gene function technologies are anti-sense RNA， RNA interference，ZFN，TALEN，CRISPR-Cas nucleases technology and so on. Those technologies aim to inhibiting or turning off the expression of the target gene， researching the change of the biological phenotype， and thus their related functions were speculated. In the practical studies， loss of gene function is always along with gene overexpression， providing the most direct evidence for gene function research， which was widely used in biology， medicine， agriculture and other fields. This paper systematically introduces the developing history， technological principles and application of some common loss of gene function technologies， and the protest of their future research and application is introduced. Key words： anti-sense RNA； RNA interference； ZFN； TALEN； CRISPR-Cas nucleases 20世?o50年代DNA双螺旋结构的发现，标志着人们对生命科学的研究进入了分子生物学时代。随着后基因组时代的到来，基因组学的研究重心从揭示生命的所有遗传信息结构、组成等转移到对功能的研究上。除了传统的转基因（基因过量表达）外，定向抑制或完全消除特定基因的表达也是目前研究基因生物学功能的重要手段。因此，出现了反义RNA、RNA干扰等技术。随着研究技术手段的发展，近年来又兴起了ZFN技术、TALEN技术、CRISPR-Cas系统等基因功能修饰技术。这些技术不断被发现及应用，极大地促进了生物学研究的发展。本研究主要对基因功能缺失技术发展历程、技术原理及应用等方面进行概述 1 反义RNA技术 反义RNA是指与靶RNA（多为mRNA）具有互补序列的RNA分子，它通过与靶RNA进行碱基互补配对的结合