制药分离工程实验指导定稿.docVIP

四川理工学院 制药分离工程实验指导 第一版 制药工程系 编 二○一二 年 目 录 实验一 细胞SOD的提取和分离 - 1 - 实验二 大枣中多糖的提取分离 3 实验三 有机溶剂沉淀法制备大豆脲酶 5 实验四 柱层析法对色素的提取与分离 7 实验五 质粒的提取及电泳分离 9 实验六　八角茴香油的提取与检识 11 实验七 秦皮中七叶苷和七叶内酯的提取、分离与鉴定 14 实验八 大孔吸附树脂分离纯化白头翁皂苷 16 实验九 重结晶及过滤 18 实验十 简单蒸馏及分馏 3 实验一 细胞SOD的提取和分离 一、实验目的 1．掌握有机溶剂沉淀法的原理和基本操作。 2．掌握SOD酶提取分离的一般步骤。 二、实验原理 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是一种具有抗氧化、抗衰老、抗辐射和消炎作用的药用酶。它可催化超氧负离子(O2-)进行歧化反应，生成氧和过氧化氢。大蒜蒜瓣和悬浮培养的大蒜细胞中含有较丰富的SOD，通过组织或细胞破碎后，可用pH7.8的磷酸缓冲溶液提取出来。由于SOD不溶于丙酮，可用丙酮将其沉淀析出。 有机溶剂沉淀的原理是有机溶剂能降低水溶液的介电常数，使蛋白质分子之间的静电引力增大。同时，有机溶剂的亲水性比溶质分子的亲水性强，它会抢夺本来与亲水溶质结合的自由水，破坏其表面的水化膜，导致溶质分子之间的相互作用增大而发生聚集，从而沉淀析出。 三