2016新课标创新人教生物选修312基因工程的基本操作程序.docVIP

一、基因工程的基本操作程序 目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。 二、目的基因的获取 1．目的基因 主要是编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子。 2．获取目的基因的依据 基因的核苷酸序列，基因的功能，基因在染色体上的位置，基因的转录产物mRNA，基因的表达产物蛋白质。 3．目的基因的获取方法 (1)从基因文库中获取目的基因 ①基因文库含义：将含有某种生物不同基因的许多 DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。 基因文库种类 (2)利用PCR技术扩增目的基因 PCR技术全称是多聚酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 原理：DNA双链复制。 扩增过程 变性：目的基因DNA受热变性后解链为单链 ↓ 复性：引物与单链相应互补序列结合 ↓ 延伸：在DNA聚合酶作用下延伸子链 (3)人工合成法：适于合成基因较小，且核苷酸序列已知的目的基因。 三、基因表达载体的构建——基因工程的核心 1．基因表达载体的组成 (1)目的基因。 (2)启动子 (3)终止子 (4)标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因。 2.基因表达载体的功能 (1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。 (2)使目的基因能够表达和发挥作用。 四、将目的基因导入受体细胞 1