项目七吸光光度分析法.PDFVIP

项目七 吸光光度分析法 学习要求 （1 ）了解光的基本性质，物质颜色的产生及物质对光的选择性吸收； （2 ）掌握光的吸收定律； （3 ）掌握显色反应及其条件的选择； （4 ）了解常用的分光光度计的结构，掌握分光光度计的操作； （5 ）掌握氨氮、总磷、总氮、色度和油类等水质指标的测定方法。 基础知识 一、吸光光度分析法概论 吸光光度分析法是根据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。通常 包括比色分析法和分光光度法。在分光光度法中，根据所用光源的波长区域的不 同，又分为可见光分光光度法、紫外分光光度法和红外分光光度法。 有色溶液颜色的深浅与有色溶质的浓度大小有关。浓度越大，则颜色越深； 浓度越小，则颜色越浅。如KMnO4 溶液，当其浓度很小时，溶液呈粉红色，随着 ·104 · Fe2+ 浓度的增加，溶液呈深红、紫红色。 可与邻二氮菲生成一稳定的红色配合物， 在一定条件下，当有适量的邻二氮菲存在时，Fe2+ 浓度越大，其红色颜色越深。这 些现象说明，溶液颜色的深浅与溶质的含量之间存在着一定的函数关系，因此， 可以根据溶液颜色的深浅来确定溶液中溶质的含量。这种通过比较溶液颜色的深 浅来确定物质含量的方法称为比色分析法。 在比色分析法中，所使用的波长范围较宽（即单色性差），因此测定的准确度、 灵敏度较差，应用范围较窄。随着近代仪器的发展，目前已使用分光光度计测定 溶液中有色物质的浓度及应用波长范围很窄的光（较纯的单色光）与被测物作用。 根据有色物质溶液对光的吸收程度来确定该物质的含量，这种方法称为吸光光度法。 吸光光度法主要应用于测定试样中微量组分的含量，与滴定分析法，重量分 析法相比较有以下一些特点： 第一，灵敏度高。这种方法分析测定摩尔浓度下限一般可达 10−5 ～ 10−6 mol L−1 0.001% 1% · ，是测定微量组分（ ～ ）的常用方法。 5% 10% 2% 第二，准确度高。一般比色分析法的相对误差为 ～ ，分光光度法为 ～ 5% ，其准确度看起来比重量法和滴定法低。但对微量组分的测定来说已完全能够 满足要求。 第三，操作简便，测定快速。近年来一些灵敏度高选择性好的显色剂和掩蔽 剂的应用，使测定不经分离就可进行，大大提高了测定速度。此外吸光光度分析 ·105 · 所用仪器设备也不复杂，操作方便，容易掌握。 第四，应用广泛。几乎所有的无机离子和许多有机化合物都可以直接或间接 地用比色分析法和分光光度法进行测定，所以吸光光度分析法广泛应用于水质分析。 二、吸光光度法基本原理 （一）物质的颜色和对光的选择性吸收 吸光光度分析法是根据物质对光的选择性吸收而建立的。比色分析和分光光 度法研究的是溶液对光的选择吸收行为，因此溶液的颜色反映出物质吸收光的波 长范围，颜色的深浅反映出物质对某波长范围的光的吸收程度。物质的颜色是物 质对可见光选择性吸收的结果，物质呈现何种颜色，与光的组成和物质本身的结 构有关。 1. 光的基本性质 光是一种电磁辐射或叫电磁波。光具有波粒二象性，即波动性和粒子性，光 的波动性表现在光能产生干涉、辐射、折射、偏振等现象，可由波长λ （cm ）、频 率ν （Hz ）和光速c （cm/s ，在真空中约为3×1010 cm/s ）来定量描述。其关系式为： λν=c （7- 1 ） ·106 · 光电效应则表现出光具有粒子性。光可以看作是具有一定能量的粒子流，这 种粒子称为光量子或光子。光子的能量与波长