仪器分析第十章色谱法导论概要1.ppt

目的要求 了解色谱法的分类及特点。 熟悉色谱过程及常用术语。 掌握色谱法的基本原理。 一、色谱法的起源和发展 俄国植物学家M.Tsweet于1906年首次提出色谱法： 在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。 此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。 (1）粗叶绿素+石油醚 柱 色 谱 实 验 装 置 20世纪30年代 离子交换色谱建立 1931年 库恩 奥地利化学家 胡萝卜素植物色素分离 40年代 Tiselius 吸附色谱与电泳 Martin 分配色谱、纸色谱和薄层色谱技术 50年代 Martin Synge 气-液色谱法 提出塔板理论 Van Deemter 提出速率理论 Golay 发明高效毛细管柱气相色谱 60年代 Horvathe 高效液相色谱法建立 80年代 离子色谱、超临界流体色谱、高效毛细管电泳、场流动分级分离 Tiselius, A.W.K. Martin, A.J.P. Synge, R.L.M. 1948年 Nobel 化学奖 1952年 Nobel 化学奖 吸附色谱与电泳 分配色谱及塔板理论 现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。 二、色谱分离基本原理 在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。 色谱法的分离原理就是利用待分离的各种组分在两相 中的分配系数、吸附能力、亲和能力等不同来进行分离 的。 使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一 固定于柱中或平板上并与流动相互不相溶的固定相表面。 当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组 分与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 三、色谱法的分类 色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的 分类方法。 ㈠按两相状态分类 色谱法中，流动相可以是气体，也可以是液体，由此可分 为气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。固定相既可以 是固体，也可以是涂在固体上的液体，由此又可将气相色谱 法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液- 液色谱。分类情况如下： ㈡ 按分离机理分类 1.吸附色谱法: 利用吸附剂（固定相一般是固体）表面对不同组分吸附能力的差别进行分离的方法。 2.分配色谱法: 利用不同组分在两相间的分配系数(或溶解度)的差别进行分离的方法。 3.离子交换色谱: 利用溶液中不同离子与离子交换剂间的交换能力的不同而进行分离的方法。 4.尺寸排阻色谱法:利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离的方法。 ㈢ 按操作形式分类 (1)纸色谱法: 利用滤纸作载体，吸附在纸上的水作固定相，样品点在滤纸一端，用流动相展开进行分离的色谱方法。 (2)薄层色谱法: 将固体吸附剂在玻璃板或塑料板上制成薄层作固定相，采用与纸色谱类似的操作进行分离的色谱方法。 (3)薄膜色谱法: 将分子固定相制成薄膜，采用与纸色谱类似的操作方法。 图示 色谱法简单分类 回忆 1.分光光度法对多组分定量分析的方法分类（解线性方程组3种、双波长分光光度法、导数光谱法） 2.色谱的起源 3.色谱的分离原理 4.色谱法的分类 ①液相柱色谱的分类 ②气相色谱的分类 ③平面色谱的分类 二、色谱流出曲线 从流动相带着组分进入色谱柱起就用检测器检测流 出柱后的流出物, 并用记录器记录信号随时间变化的 曲线，此曲线就叫色谱流出曲线，当待测组分流出色 谱柱时，检测器就可检测到其组分的浓度，在流出曲 线上表现为峰状，叫色谱峰。 三、基本概念 1.基线:在实验条件下，色谱柱后仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线称为基线。基线在稳定的条件下应是一条水平的直线。它的平直与否可反应出实验条件的稳定情况。 2