纳米羟基磷灰石对人脂肪干细胞共混物三维生物打印影响的初步研究.pdfVIP

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2017-07-02 发布于北京
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纳米羟基磷灰石对人脂肪干细胞共混物三维生物打印影响的初步研究.pdf

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北京大学学报（医学版）８·９４ · ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＰＥＫＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＨＥＡＬＴＨＳＣＩＥＮＣＥＳ）Ｖｏｌ．４８Ｎｏ．５Ｏｃｔ．２０１６ ·论著· 纳米羟基磷灰石对人脂肪干细胞共混物三维生物打印影响的初步研究宋杨，王晓飞，王宇光，董凡，吕培军△ （北京大学口腔医学院·口腔医院，口腔医学数字化研究中心，口腔修复教研室口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室口腔数字医学北京市重点实验室，卫生部口腔医学计算机应用工程技术研究中心，北京１０００８１）［摘要］目的：初步研究纳米羟基磷灰石对人脂肪间充质干细胞（ｈｕｍａｎａｄｉｐｏｓｅｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ｈＡＳＣｓ）共混物三维生物打印体细胞增殖和成骨分化的影响。方法：以Ｐ代ｈＡＳＣｓ作为种子细胞，将１０ｇ／Ｌ纳米羟５６基磷灰石加入细胞海藻酸钠明胶共混物（２０ｇ／Ｌ海藻酸钠，８０ｇ／Ｌ明胶，细胞密度约为１×１０个／ｍＬ）混合后进行三维生物打印，作为实验组；另将细胞海藻酸钠明胶共混物直接进行三维生物打印，作为对照组。在打印后的既定时间点上，对实验组和对照组分别进行显微镜观察、ＣＣＫ８检测、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测和ＰＣＲ检测，分析打印体细胞增殖能力和成骨分化能力。结果：显微镜观察和ＣＣＫ８检测结果显示，实验组和对照组打印体内细胞在打印完成后２４ｈ和７ｄ均呈现良好的增殖能力。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示，在打印完成后１４ｄ，实验组和对照组的Ｒｕｎｔ相关转录因子（Ｒｕｎｔｒｅｌａｔｅｄｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ２，ＲＵＮＸ２）蛋白水平差异无统计学意义。ＰＣＲ结果显示，在打印完成后１４ｄ，实验组的成骨相关基因ＲＵＮＸ２、ｏｓｔｅｒｉｘ（ＯＳＸ）和骨钙素（ｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎ，ＯＣＮ）表达明显高于对照组。结论：纳米羟基磷灰石加入后，打印体内细胞仍具有良好的增殖性，且打印体的体外成骨分化能力得到了增强。［关键词］打印，三维；纳米羟基磷灰石；间充质干细胞；脂肪组织［中图分类号］Ｒ３２９．４［文献标志码］Ａ［文章编号］１６７１１６７Ｘ（２０１６ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１１６７Ｘ．２０１６．０５．０２７Ａｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｙｆｏｒｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｎａｎｏｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｏｎｈｕｍａｎａｄｉｐｏｓｅ-ｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｍｉｘｔｕｒｅ３Ｄｂｉｏ-ｐｒｉｎｔｉｎｇ △ ＳＯＮＧＹａｎｇ，ＷＡＮＧＸｉａｏｆｅｉ，ＷＡＮＧＹｕｇｕａｎｇ，ＤＯＮＧＦａｎ，ＬＵＰｅｉｊｕｎ（ＣｅｎｔｅｒｏｆＤｉｇｉｔａｌＤｅｎｔｉｓｔｒｙ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｒｏｓｔｈｏｄｏｎｔｉｃｓ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌａｎｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ＆ＮａｔｉｏｎａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＤｉｇｉｔａｌａｎｄＭａｔｅｒｉａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＳｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ＆ＢｅｉｊｉｎｇＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＤｉｇｉｔａｌＳｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，ＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｆｏｒＤｉｇｉｔａｌＤｅｎｔｉｓｔｒｙｏｆＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８１，Ｃｈｉｎａ）ＡＢＳＴＲＡＣＴＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｎａｎｏｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｏｎｈｕｍａｎａｄｉｐｏｓｅ-ｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙ- ｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ（ｈＡＳＣｓ）ｍｉｘｔｕｒｅ３Ｄｂｉｏ-ｐｒｉｎｔｉｎｇｆｏｒｃｅｌｌｓ’ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｐ