肝素钠的提取及其乳膏的制备介绍.pptVIP

我们毕业啦 其实是答辩的标题地方 肝素钠的提取及其乳膏制备 组员 指导老师 研究背景 肝素钠的提取 分析总结 CONTANTS 肝素钠效价的测定 肝素钠乳膏的制备 研究背景 It was the best of times, it was the worst of times; it was the age of wisdom, it was the age of foolishness. 肝素钠 (Heparin Sodium ) ： 从动物结缔组织的肥大细胞提取的钠盐,，属粘多糖类物质。 天然抗凝血物质, 被广泛用于治疗血栓塞、暴发性流脑、败血症等疾病。 从生物学角度来讲, 肝素钠是一种含硫酸脂的氨基葡萄糖、艾杜糖醛酸和葡萄糖酸的生物活性物质。在机体内它与蛋白质结合成复合物存在于肥大细胞中, 可被蛋白酶解离出来, 它在溶液中呈强电荷的聚阴离子状态, 与强碱性D208阴离子树脂有较强的亲和力, 易被吸附而分离。 研究背景 肝素钠结构式 临床上肝素钠的常见剂型包括注射剂和乳膏剂。 乳膏剂是外用法给药的剂型之一，通过皮肤、孔窍、经络及病变局部等部位治疗疾病，避免了胃肠道的破坏与肝首过效应，减少血药浓度峰谷变化，已成为克服药物副作用的有效用药途径之一。 肝素钠乳膏剂（Heparin sodium Cream）常用于早期冻疮、皲裂、溃疡、湿疹及浅表性静脉炎和软组织损伤。 工艺现状： 以猪小肠粘膜提取肝素钠为主； 生产得率较低, 且混有大量有害物质, 不利于临床应用； 需大量进口, 价格昂贵。 研究背景 肝素钠的提取 It was the best of times, it was the worst of times; it was the age of wisdom, it was the age of foolishness. 实验方法： 1.原料采集及酶解吸附 2.离子交换吸附 2.1 D208树脂预处理 2.2 吸附与洗脱 静态吸附：将上述树脂加入到已处理好的酶解液中，混匀，调节pH至8.5，置于混合器上搅拌过夜吸附。 线性洗脱：装填静态吸附后的树脂，按下表配置洗脱液。 静态洗脱：取动态洗脱的树脂于烧杯，加入4mol/LNacl溶液，搅拌吸附30min，取上清液，留样。 3.肝素钠的精制 46.8 200 4 mol/L Nacl 0.7 25 0.5 mol/L Nacl 17.5 100 3mol/LNacl 2.9 100 3%Nacl 重量（g） 体积（ml） 试剂 肝素钠的提取 实验结果： 1.离子交换吸附 肝素钠洗脱曲线图 在肝素钠动态洗脱曲线图中有一峰谷，代表洗脱出来的是杂质峰，在此之前和之后分别有一个持续平衡的吸光度范围，其吸光值为0.509-0.513，由此可判断A=0.513为仪器在220nm处可显示的最大吸光度。第二个下降区吸光度由0.513下降至0.086，表示树脂上的物质逐渐洗脱完全。 肝素钠的提取 在第二个稳定吸光度区（A=0.513-0.509）收集洗脱液与加入乙醇后对比，呈现明显的浑浊，见图3。其原因可能是由于肝素钠是一种多糖，加入乙醇后通过降低水溶液的介电常数脱水，从而产生沉淀分离。在反应过程中发现：加热会使浑浊溶液澄清，而冷冻会增加沉淀析出量，所以反应受到温度的影响；当然反应过程中乙醇浓度增大时，沉淀析出量也会增加。 A=0.509-0.513处洗脱液加入乙醇前（左）和加入乙醇后（右）对比图 2.肝素钠的精制 白色略黄肝素钠粉末，共0.0131g 肝素钠成品 肝素钠的提取 肝素钠的效价测定 It was the best of times, it was the worst of times; it was the age of wisdom, it was the age of foolishness. 实验方法： 1.效价测定 按下表处理标准品、样品及成品： 0.025 0.1 0.125 0.000026g/mL 成品 0.05 0.2 0.25 稀释10倍 样品2号 0.05 0.2 0.25 稀释10倍 样品1号 0.05 0.2 0.25 1.341 0.05 0.2 0.25 1.14 0.05 0.2 0.25 0.969 标准品 0.05 - 0.25 - 空白 1% Cacl2溶液（mL） 肝素稀释液（mL） 血浆（mL） 浓度（u/mL） 肝素钠溶液 先加入血浆，置37±0.5℃恒温水浴保温5min；取出后加入肝素钠溶液，然后迅速加入1% Cacl