人snap25基因重组腺病毒的构建与表达.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，２８（１０）：１８～２２ 人ＳＮＡＰ２５基因重组腺病毒的构建与表达 １ ２ ３ ３ １，３ ３ 庄国庆 　王有利 　马军丽 　刘　芬 　王　嵬 　何　燕 （１中国科学院研究生院生命科学院　北京　１０００４９　２北京大学人民医院　北京　１０００４４） （３首都医科大学公共卫生与家庭医学学院　北京　１０００６９） 摘要　利用ＲＴＰＣＲ法，从人胰腺组织扩增出ＳＮＡＰ２５基因，定向克隆至ｐＥＮＴＲＴＯＰＯ载体获得 重组质粒ｐＥＮＴＲ／ＤＴＯＰＯＳＮＡＰ２５。经ＰＣＲ及测序验证其阅读框正确。再与腺病毒载体ｐＡＤ／ ＴＭ Ｒ ＣＭＶ／Ｖ５ＤＥＳＴ发生ＬＲ重组反应，ＳＮＡＰ２５取代ｐＡＤ／ＣＭＶ／Ｖ５ＤＥＳＴ 中的ｃｃｄＢＣｍ基因，获得 重组腺病毒载体ｐＡＤ／Ｃ