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干燥条件对青花椒色泽的影响分析
干燥条件对青花椒色泽的影响分析
本研究为在尽量接近青花椒自然干燥的情况下,通过对在各种干燥条件下青花椒色泽变化和叶绿素降解情况的研究,旨在为寻求一种青花椒的最佳干燥条件提供实验数据。
材料与方法
1.材料与试剂
鲜青花椒,采摘于重庆市江津区先锋镇青花椒生产基地。叶绿素及其衍生物标准品实验室自制;丙酮为色谱纯成都科龙化工试剂厂;正己烷、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、四丁基溴化铵、乙酸铵等均为分析纯成都科龙化工试剂厂。
2.仪器与设备
LC-20A分析型液相色谱仪日本岛津公司;ULTROSCANPRO测色仪HunterLab;MAP-500D电子天平上海一恒科学仪器有限公司;101-3-S电热恒温鼓风干燥箱重庆慧达实验仪器有限公司;FSH-Ⅱ型匀浆机江苏环宇科学仪器厂;RE52-98旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂;DF8517超低温冰箱ILSHIN。
3.方法
1)样品处理
实验模仿夏季自然干燥条件,夏季晴天正午地面温度在45℃左右,如遇连续阴雨天气,室内温度约为25℃。取鲜青花椒分别放置在45℃(当时室外晒制的平均温度,鼓风干燥)与25℃(当时8天室内的平均温度,相应的相对湿度变化范围为55%~75%,平均相对湿度为RH=60%,室内阴干)的温度下干燥,干燥时间分别为12h和144h(两种温度下的干燥时间是由青花椒干燥结束时水分含量是否达到成品干青花椒水分含量确定的),45℃条件下干燥的样品每隔2h取一次样,25℃条件下干燥的样品每隔24h取一次样,取得的样品立即用ULTROSCANPRO测色仪测定其颜色,其余样品用于测定叶绿素及其降解衍生物的含量与种类。由于阴干组是在室内自然阴干的,其相对湿度有一定的波动,因此为避免由环境变化所引起的差异,本试验共处理3个批次的样品,每一批次处理方法相同,25℃与RH=60%分别为3个批次处理时间内的平均温度和平均相对湿度。在45℃下干燥的青花椒设定了鲜青花椒破油胞组与不破油胞组,即把鲜青花椒表面油胞的完整性也纳入考察条件之一。破坏油胞处理:每50g新鲜青花椒分装于500mL锥形瓶中于振荡器上震荡60(s200r/min),以获得破坏油胞的样品。即设定3组实验:破油胞组(鲜青花椒经破油胞处理后放置在45℃下干燥)、未破油胞组(鲜青花椒直接放置在45℃下干燥)、阴干组(鲜青花椒放置在室内阴干,室内平均温度为25℃)。
2)青花椒色泽的测定方法
采用色度仪-电子眼检测(HunterLab),观察面积0.18mm,选用RSIN-包括镜面反射模式,滤光片位置:微量的。采用国际CIELab色度空间(国际照明协会)表示颜色,仪器校正完成后开始测量样品花椒的L、a、b值,每个样品测量20颗青花椒,每颗测一次。CIELab由亮度(L)和两个颜色轴(a、b)组成,L为垂直轴,代表亮度,它的值在0~100之间,0表示绝对黑色,100表示绝对白色。a、b是水平轴,a代表红绿轴(-a代表绿,+a代表红,a值变化范围为-100~+100);b为蓝黄轴(-b代表蓝,+b代表黄,b值变化范围为-100~+100)[12-13]。测量完成后由CIELAB模式转换为CIELCh模式即可得到所测颜色的C值和h值,分别代表所测颜色的彩度和色相。总色差△E*的计算以新鲜青花椒的L、a、b值作为标准对照,根据国际ASTME308-99标准,相应的计算公式为:(略)
3)叶绿素及其降解衍生物含量的测定方法
参考Fraser[14]和Arkus[15]等的方法。将制备好的叶绿素a、叶绿素b、脱植基叶绿素a、脱植基叶绿素b和脱镁叶绿酸a配制成不同浓度的80%丙酮溶液,用高效液相色谱仪进行测定,绘制的标准曲线见表1,对于那些不常见且不易制备的叶绿素衍生物均采用与其具有相似吸收光谱的物质的标准曲线进行定量。样品前处理的方法:参考Roca[16]等的方法。称取青花椒样品5.0g,加入到用MgCO3饱和过的50mLN,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液中,匀浆后过滤,滤渣再用50mLDMF提取,过滤。合并、收集滤液于分液漏斗中,加入正己烷(50mLtimes;3)用以除去油脂和部分类胡萝卜素,叶绿素类色素保留在DMF相中。将富含叶绿素的DMF溶液低压旋转蒸发(低于30℃)去掉DMF溶剂后,残余物溶于5mL丙酮中,此样品溶液过0.45mu;m有机滤膜后用于高效液相色谱分析。液相色谱分析条件:色谱柱为GLSciencescolumn(ODS-SP,4.6times;250mm,5mu;m);流动相A相组成比例为1:1:8的离子对:水:甲醇(离子对为含有四丁基溴化铵(0.05mol/L)和醋酸铵(1.0mol/L)的水溶液),B相组成比例为1:1的甲醇:丙酮;洗脱程序为:B相在35min内由0%线
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